Question

圖1表示含有目的基因D的DNA片段和部分堿基序列，圖2表示一種質粒的結構和部分堿基序列．現有MspⅠ、

BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4種限制性核酸內切酶切割的堿基序列和酶切位點，分別為C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG．請回答下列問題：

（1）圖1的一條脫氧核苷酸鏈中相鄰兩個脫氧核苷酸之間由 （填化學鍵名稱）連接．

（2）若用限制酶SmaⅠ完全切割圖1中DNA片段，產生的末端是 末端，其產物長度為 ．

（3）若圖1中虛線方框內的堿基對被T﹣A堿基對替換，那么基因D就突變?yōu)榛�因d．從雜合子分離出圖1及其對應的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，產物中共有 種不同的DNA片段．

（4）若將圖2中質粒和目的基因D通過同種限制酶處理后進行連接，形成重組質粒，那么應選用的限制酶是 ．在導入重組質粒后，為了篩選出含重組質粒的大腸桿菌，一般需要用添加了 的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)．經檢測，部分含有重組質粒的大腸桿菌菌株中目的基因D不能正確表達，其最可能的原因是 ．

Answer 1