Question

11．回答下列有關(guān)微生物的問題．
孔雀石綠（C₂₃H₂₅N₂Cl）常用作紡織業(yè)的染料，也可用作水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的殺菌驅(qū)蟲劑．但它具有高毒性、高殘留的危害，因此對孔雀石綠廢水的處理已成為環(huán)境科學(xué)領(lǐng)域關(guān)注的熱點．科研人員從某化工廠污水池中分離獲得了能降解孔雀石綠的細(xì)菌菌株A．主要步驟如圖1所示．

（1）①過程稱為稀釋，②過程是為了篩選．
（2）I號培養(yǎng)基中應(yīng)加入孔雀石綠作為唯一碳源．使用稀釋涂布平板（或平板劃線）法接種可以在II號培養(yǎng)基上獲得單個菌落．接種時的關(guān)鍵是“無菌”，確保無菌的方法有在超凈臺中進行接種、接種操作在酒精燈火焰附近進行、接種環(huán)（針）在接種前后要過火并燒成紅色（寫出2種）．
實驗中使用的培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿需要高壓蒸汽滅菌法進行滅菌，高壓蒸汽滅菌的要求是1.05kg/cm²（103kPa），121⁰C，時間15～30分鐘，因為此條件下可以殺死包括芽孢在內(nèi)的所有微生物．
（3）研究人員進一步研究了不同金屬離子對菌株A降解孔雀石綠的影響，實驗結(jié)果如圖2．從圖2中可以看出多數(shù)金屬離子對菌株A降解孔雀石綠有抑制作用，唯有Pb²⁺的作用相反．若要排除Pb²⁺本身對孔雀石綠有降解作用，則應(yīng)如何設(shè)置可作對照的培養(yǎng)基樣本含等量的Pb²⁺但不接種菌株A．

Answer 1

分析 1、微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求．對異養(yǎng)微生物來說，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營養(yǎng)要素成分時并不是起單一方面的作用．
2、微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落．

解答 解：（1）分析實驗可知，圖中①過程稱為稀釋，②過程是為了篩選能降解孔雀石綠的細(xì)菌菌株A．
（2）本實驗的實驗?zāi)康氖菑哪郴�工廠污水池中分離獲得了能降解孔雀石綠的細(xì)菌菌株A，I號培養(yǎng)基中應(yīng)加入孔雀石綠作為唯一碳源．使用稀釋涂布平板（或平板劃線）法接種可以在II號培養(yǎng)基上獲得單個菌落．接種時的關(guān)鍵是“無菌”，確保無菌的方法有在超凈臺中進行接種、接種操作在酒精燈火焰附近進行、接種環(huán)（針）在接種前后要過火并燒成紅色．
實驗中使用的培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿需要高壓蒸汽滅菌法進行滅菌，高壓蒸汽滅菌的要求是1.05kg/cm²（103kPa），121⁰C，時間15～30分鐘，因為此條件下可以殺死包括芽孢在內(nèi)的所有微生物．
（3）由圖分析可知，與不加金屬離子的對照組相比，多數(shù)金屬離子對菌株A降解孔雀石綠有抑制作用，唯有Pb²⁺的作用相反．若要排除Pb²⁺本身對孔雀石綠有降解作用，則應(yīng)設(shè)置含等量的Pb²⁺但不接種菌株的培養(yǎng)基樣本作為對照．
故答案為：
（1）稀釋      篩選
（2）孔雀石綠      稀釋涂布平板（或平板劃線）     在超凈臺中進行接種、接種操作在酒精燈火焰附近進行、接種環(huán)（針）在接種前后要過火并燒成紅色   1.05kg/cm²（103kPa），121⁰C，時間15～30分鐘
（3）抑制         含等量的Pb²⁺但不接種菌株A

點評 本題主要考查微生物的利用、微生物的分離和培養(yǎng)的相關(guān)知識，要求考生能夠識記微生物分離與純化的方法，掌握消毒和滅菌的方法，能夠根據(jù)題圖獲得有效解題信息，難度適中．