Question

19．如圖表示利用某種細(xì)菌中提取的抗蟲基因培養(yǎng)抗蟲玉米的大致過程．請回答下列問題：

（1）A過程所需的酶是限制酶和DNA連接酶．構(gòu)建重組質(zhì)粒時，將抗蟲基因連接到Ti質(zhì)粒的
T-DNA上．將重組質(zhì)粒導(dǎo)入土壤農(nóng)桿菌的方法是Ca⁺處理法．圖中D過程的方法稱為農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．
（2）圖中重組質(zhì)粒，除了含有目的基因外，還必須有啟動子、終止子、標(biāo)記基因和復(fù)制原點；培育轉(zhuǎn)基因玉米成功的標(biāo)志是玉米植株表現(xiàn)出抗蟲性狀（玉米細(xì)胞產(chǎn)生了抗蟲蛋白）．
（3）E過程需要運用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，經(jīng)過脫分化和再分化過程最終形成植株，其依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性．

Answer 1

分析 根據(jù)題意和圖示分析可知：圖示為通過基因工程方法培育轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米的大致過程，其中A表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，BCD表示采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入玉米�?xì)胞，E表示采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將玉米細(xì)胞培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米

解答 解：（1）A過程為示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，所需的酶是限制酶和DNA連接酶．圖中D過程采用了農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其原理是：農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上．根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點，如果將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上．之后用Ca²⁺處理細(xì)胞，使其農(nóng)桿菌成為感受態(tài)細(xì)胞，再將重組表達(dá)載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子．通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目的基因整合到植物細(xì)胞中染色體的DNA上．
（2）圖中A表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，該過程需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和運載體，還需要用DNA連接酶將目的基因和運載體連接形成重組質(zhì)粒；重組質(zhì)粒的組成至少包括目的基因、啟動子、終止子、標(biāo)記基因和復(fù)制原點；培育轉(zhuǎn)基因玉米成功的標(biāo)志是玉米植株表現(xiàn)出抗蟲性狀；
（3）E過程需要運用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，經(jīng)過脫分化和再分化過程最終形成植株，其依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性．
故答案為：
（1）限制酶和DNA連接酶     T-DNA    Ca⁺處理法      農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法
（2）啟動子、終止子、標(biāo)記基因     玉米植株表現(xiàn)出抗蟲性狀（玉米細(xì)胞產(chǎn)生了抗蟲蛋白）  
（3）植物組織培養(yǎng)   脫分化和再分化    植物細(xì)胞的全能性

點評 本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米的培育過程圖解，考查基因工程和植物組織培養(yǎng)技術(shù)的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理、工具及操作步驟，掌握各步驟中涉及的相關(guān)細(xì)節(jié)，能準(zhǔn)確判斷圖中各步驟的名稱；識記植物組織培養(yǎng)技術(shù)的原理及條件，能結(jié)合圖中信息答題