Question

4．毛角蛋白Ⅱ型中間絲（KIFⅡ）基因與絨山羊的羊絨質(zhì)量密切相關(guān)．獲得轉(zhuǎn)KIFⅡ基因的高絨質(zhì)絨山羊的簡單流程如圖．

（1）在過程②中，先用胰蛋白酶處理將皮膚組織塊分散成單個(gè)成纖維細(xì)胞．在培養(yǎng)過程中，將成纖維細(xì)胞置于5%CO₂的氣體環(huán)境中，CO₂的作用是維持培養(yǎng)基（液）的pH．
（2）在過程③中，用促性腺激素處理以獲取更多的卵（母）細(xì)胞．卵（母）細(xì)胞應(yīng)培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期期．成熟卵（母）細(xì)胞在核移植前需要進(jìn)行去核處理．
（3）將重組細(xì)胞移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)，以檢查其發(fā)育能力；進(jìn)而在胚胎移植前，通過胚胎分割技術(shù)可獲得較多胚胎．

Answer 1

分析 圖示過程為利用基因工程技術(shù)獲得轉(zhuǎn)KIFⅡ基因的高絨質(zhì)絨山羊的過程．圖中①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，一般將目的基因與運(yùn)載體利用限制酶和DNA連接酶構(gòu)成重組質(zhì)粒；過程②表示利用動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)受體細(xì)胞；過程③為通過超數(shù)排卵的方法獲得更多的卵細(xì)胞．

解答 解：（1）將組織塊分散成單個(gè)細(xì)胞往往用胰蛋白酶（膠原蛋白酶）處理，在動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，為維持培養(yǎng)液的PH值，往往加入5%CO₂．
（2）要得到更多的卵（母）細(xì)胞需用促性腺激素對動物進(jìn)行超數(shù)排卵處理；成熟卵（母）細(xì)胞應(yīng)培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期，在核移植前需要進(jìn)行去核處理，以保證克隆后代的遺傳性狀主要來自于供體核．
（3）精子與卵子在體外受精后，應(yīng)移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)，以便檢查受精狀況和受精卵的發(fā)育能力．進(jìn)而在胚胎移植前，通過胚胎分割技術(shù)可獲得較多胚胎．
故答案為：
（1）維持培養(yǎng)基（液）的pH
（2）促性腺激素  減數(shù)第二次分裂中期   去核
（3）發(fā)育    胚胎分割

點(diǎn)評 本題主要考查基因工程、動物細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎移植、動物細(xì)胞核移植等技術(shù)，意在考查考生對基礎(chǔ)知識的識記能力，屬于基礎(chǔ)題．