Question

19．科研人員為了分離、篩選藍(lán)莓果酒專(zhuān)用酵母來(lái)改善藍(lán)霉果酒的品質(zhì)，進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)：
①取不同品種成熟藍(lán)莓制果漿，置于恒溫培養(yǎng)箱中自然發(fā)酵至產(chǎn)生大量氣泡和明顯酒味．
②將藍(lán)莓發(fā)酵液梯度稀釋后，進(jìn)行涂布平板操作，每個(gè)濃度梯度3個(gè)平板，并在恒溫下培養(yǎng)2d，根據(jù)酵母菌菌落特征挑取單菌落．
③將挑取的單菌落擴(kuò)大培養(yǎng)后，通過(guò)平板劃線法分離純化并保存．
④檢測(cè)篩選菌株的發(fā)酵性能，得到如下實(shí)驗(yàn)結(jié)果．

品種	乙醇體積分?jǐn)?shù)/%					pH
	8%	10%	12%	14%	15%	4.00	2.98	2.03	1.48
葡萄釀酒酵母	++++	++++	+	-	-	++++	++++	-	-
BL-21	++++	+++	+	-	-	++++	++++	-	-
BF-09	++++	++++	++	-	-	++++	++++	+	-
BF-17	++++	++++	++	+	-	++++	++++	++	-

注“-”表示不產(chǎn)氣；“+”表示產(chǎn)氣越多產(chǎn)氣越多．
請(qǐng)分析回答：
（1）步驟①恒溫培養(yǎng)箱的溫度控制在20°C左右，其主要目的是使酵母菌細(xì)胞快速生長(zhǎng)、繁殖．
（2）步驟②中，發(fā)酵液應(yīng)使用無(wú)菌水進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)�稀釋涂布平板法依�?jù)的原理是在稀釋度足夠高的菌液里，將聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落．
（3）配制培養(yǎng)某的豐要步驟是：計(jì)算-稱(chēng)量-溶化-滅菌-倒平板．在接種前，隨機(jī)取 若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格．
（4）步驟③平板劃線時(shí)，常用的工具是接種環(huán)，對(duì)接種環(huán)的處理要求是每次劃線前后都要用灼燒法對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌．
（5）固體焙養(yǎng)某常用瓊脂作凝固劑，理想的凝固劑應(yīng)具有的特點(diǎn)是BDE（多選）．
A．含有某些特殊的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)
B．消毒滅菌不會(huì)改變其特性
C．能被微生物分解和利用    
D．微生物生長(zhǎng)溫度范圍內(nèi)保持固體狀態(tài)
E．配制方便且有良好的透明性
（6）根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果推知，BF-17（品種）是較理想的釀酒菌種．

Answer 1

分析 1、參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類(lèi)型為異養(yǎng)兼性厭氧型．果酒制作的原理：
（1）在有氧條件下，反應(yīng)式如下：C₆H₁₂O₆+6H₂O+6O₂$\stackrel{酶}{→}$6CO₂+12H₂O+能量；            
（2）在無(wú)氧條件下，反應(yīng)式如下：C₆H₁₂O₆$\stackrel{酶}{→}$2CO₂+2C₂H₅OH+能量．
2、稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)�然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基表面，進(jìn)行培養(yǎng)；在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落．

解答 解：（1）酵母菌生長(zhǎng)的適宜溫度是18-25℃，所以步驟①恒溫培養(yǎng)箱的溫度控制在20℃左右，目的是為酵母菌細(xì)胞生長(zhǎng)、繁殖提供適宜的溫度．
（2）步驟②中，發(fā)酵液應(yīng)使用無(wú)菌水進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)�稀釋涂布平板法依�?jù)的原理是在稀釋度足夠高的菌液里，將聚集在一起的菌種分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落．
（3）配制培養(yǎng)某的豐要步驟是：計(jì)算-稱(chēng)量-溶化-滅菌-倒平板．在接種前，隨機(jī)取 若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格．
（4）步驟③平板劃線時(shí)，常用的工具是接種環(huán)，對(duì)接種環(huán)的處理要求是每次劃線前后都要用灼燒法對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌．
（5）固體焙養(yǎng)某常用瓊脂作凝固劑，理想的凝固劑應(yīng)具有的特點(diǎn)是消毒滅菌不會(huì)改變其特性、微生物生長(zhǎng)溫度范圍內(nèi)保持固體狀態(tài)、配制方便且有良好的透明性．故選：BDE．
（6）根據(jù)題意和圖表分析可知：品種BF-17是較理想的釀酒菌種．
故答案為：
（1）20°C      使酵母菌細(xì)胞快速生長(zhǎng)、繁殖
（2）無(wú)菌水      在稀釋度足夠高的菌液里，將聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落
（3）滅菌          檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格
（4）每次劃線前后都要用灼燒法對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌
（5）BDE
（6）BF-17

點(diǎn)評(píng) 本題考查果酒的制作的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記參與果酒制作的微生物及其代謝類(lèi)型，掌握果酒制作的原理及操作條件，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．