Question

3．下列有關(guān)基因工程及其應(yīng)用的說(shuō)法中，正確的是（　　）

• A． 可用限制酶切割煙草花葉病毒的核酸
• B． 必須用相同限制酶處理目的基因和運(yùn)載體
• C． DNA連接酶連接DNA片段形成磷酸二酯鍵
• D． 運(yùn)載體上必須要有標(biāo)記基因，用于篩選

Answer 1

分析 1、限制酶：主要從原核生物中分離純化出來(lái)．特異性：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂．形成黏性末端和平末端兩種．
（1）來(lái)源：主要從原核生物中分離純化出來(lái)．
（2）特異性：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂．
（3）結(jié)果：形成黏性末端或平末端．
2、DNA連接酶：
（1）根據(jù)酶的來(lái)源不同分為兩類：E．coliDNA連接酶、T₄DNA連接酶．這二者都能連接黏性末端，此外T₄DNA連接酶還可以連接平末端，但連接平末端時(shí)的效率比較低．
（2）DNA連接酶連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵．
（3）DNA連接酶和DNA聚合酶的區(qū)別：
①DNA連接酶是在兩個(gè)DNA片段之間形成磷酸二酯鍵，而DNA聚合酶只能將單個(gè)脫氧核苷酸加到已有的核苷酸片段上，形成磷酸二酯鍵；
②DNA連接酶是同時(shí)連接雙鏈的切口，而DNA聚合酶只是在單鏈上將一個(gè)個(gè)脫氧核苷酸連接起來(lái)；
③DNA連接酶不需要模板，而DNA聚合酶需要模板
3、運(yùn)載體：
（1）常用的運(yùn)載體：質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒．（質(zhì)粒是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、獨(dú)立于細(xì)菌擬核DNA之外并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子．）
（2）作為運(yùn)載體必須具備的條件：①要具有限制酶的切割位點(diǎn)； ②要有標(biāo)記基因（如抗性基因），以便于重組后重組子的篩選；③能在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定存在并復(fù)制；④是安全的，對(duì)受體細(xì)胞無(wú)害，而且要易從供體細(xì)胞分離出來(lái)．

解答 解：A、限制酶能特異性切割DNA分子，而煙草花葉病毒的核酸是RNA，A錯(cuò)誤；
B、一般用相同限制酶處理含有目的基因的外源DNA分子和運(yùn)載體，以便形成相同的黏性末端，若兩種限制酶切割形成的突出部分的堿基序列相同，則也可以用這兩種不同的限制酶切割，B錯(cuò)誤；
C、DNA連接酶連接DNA片段形成磷酸二酯鍵，C正確；
D、運(yùn)載體上必須要有標(biāo)記基因，用于篩選，D正確．
故選：CD．

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作工具及操作步驟，掌握各操作工具的特點(diǎn)及作用，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)．