Question

3．下列有關(guān)基因工程及其應(yīng)用的說法中，正確的是（　�。�

• A． 可用限制酶切割煙草花葉病毒的核酸
• B． 必須用相同限制酶處理目的基因和運載體
• C． DNA連接酶連接DNA片段形成磷酸二酯鍵
• D． 運載體上必須要有標(biāo)記基因，用于篩選

Answer 1

分析 1、限制酶：主要從原核生物中分離純化出來．特異性：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂．形成黏性末端和平末端兩種．
（1）來源：主要從原核生物中分離純化出來．
（2）特異性：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂．
（3）結(jié)果：形成黏性末端或平末端．
2、DNA連接酶：
（1）根據(jù)酶的來源不同分為兩類：E．coliDNA連接酶、T₄DNA連接酶．這二者都能連接黏性末端，此外T₄DNA連接酶還可以連接平末端，但連接平末端時的效率比較低．
（2）DNA連接酶連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵．
（3）DNA連接酶和DNA聚合酶的區(qū)別：
①DNA連接酶是在兩個DNA片段之間形成磷酸二酯鍵，而DNA聚合酶只能將單個脫氧核苷酸加到已有的核苷酸片段上，形成磷酸二酯鍵；
②DNA連接酶是同時連接雙鏈的切口，而DNA聚合酶只是在單鏈上將一個個脫氧核苷酸連接起來；
③DNA連接酶不需要模板，而DNA聚合酶需要模板
3、運載體：
（1）常用的運載體：質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒．（質(zhì)粒是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單、獨立于細(xì)菌擬核DNA之外并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子．）
（2）作為運載體必須具備的條件：①要具有限制酶的切割位點； ②要有標(biāo)記基因（如抗性基因），以便于重組后重組子的篩選；③能在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定存在并復(fù)制；④是安全的，對受體細(xì)胞無害，而且要易從供體細(xì)胞分離出來．

解答 解：A、限制酶能特異性切割DNA分子，而煙草花葉病毒的核酸是RNA，A錯誤；
B、一般用相同限制酶處理含有目的基因的外源DNA分子和運載體，以便形成相同的黏性末端，若兩種限制酶切割形成的突出部分的堿基序列相同，則也可以用這兩種不同的限制酶切割，B錯誤；
C、DNA連接酶連接DNA片段形成磷酸二酯鍵，C正確；
D、運載體上必須要有標(biāo)記基因，用于篩選，D正確．
故選：CD．

點評 本題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理、操作工具及操作步驟，掌握各操作工具的特點及作用，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確判斷各選項．