Question

羊絨素有“軟黃金”之稱，內(nèi)蒙古絨山羊和遼寧絨山羊是我國(guó)的兩大產(chǎn)絨品種．我國(guó)生物學(xué)家運(yùn)用現(xiàn)代生物技術(shù)培育出了轉(zhuǎn)基因絨山羊，其過(guò)程如圖甲所示：

（1）在遼寧絨山羊細(xì)胞中獲取的IGFI基因在導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞之前須

 

，這是基因工程操作的核心步驟．由于無(wú)法由基因表達(dá)產(chǎn)物推知啟動(dòng)子的堿基序列，運(yùn)用PCR技術(shù)單獨(dú)克隆啟動(dòng)子存在困難．科研人員經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期研究，終于發(fā)明了如圖乙所示的一種克隆啟動(dòng)子的方法．請(qǐng)分析回答：
A．將目的基因?qū)�入�?dòng)物受精卵常用

 

技術(shù)．
B．由基因表達(dá)產(chǎn)物無(wú)法推知啟動(dòng)子堿基序列，其原因是

 

．
C．過(guò)程①需選擇的限制酶是

 

．過(guò)程④需要使用的工具酶是

 

．
D．過(guò)程④中可以根據(jù)編碼序列兩端的部分堿基序列設(shè)計(jì)

 

進(jìn)行PCR擴(kuò)增；運(yùn)用PCR擴(kuò)增DNA片段的原理是

 

．
（2）利用基因工程獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草時(shí)，將抗鹽基因?qū)�入煙草�?xì)胞內(nèi)，使煙草植株產(chǎn)生抗鹽性狀，這種新性狀（變異性狀）的來(lái)源屬于

 

．
如果將抗鹽基因直接導(dǎo)入煙草細(xì)胞，一般情況下，煙草不會(huì)具有抗鹽特性，原因是抗鹽基因在煙草細(xì)胞中不能

 

，也不能

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：1、基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建（核心）；③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞；④目的基因的檢測(cè)與鑒定．基因工程至少需要三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運(yùn)載體．
2、PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因
①原理：DNA雙鏈復(fù)制．
②過(guò)程：第一步：加熱至90～95℃DNA解鏈；第二步：冷卻到55～60℃，引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈；第三步：加熱至70～75℃，熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補(bǔ)鏈的合成．

解答： 解：（1）基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建．
A．將目的基因?qū)�入�?dòng)物受精卵常用顯微注射技術(shù)．
B．基因中啟動(dòng)子的堿基序列不能被轉(zhuǎn)錄，因此由基因表達(dá)產(chǎn)物無(wú)法推知啟動(dòng)子堿基序列．
C．據(jù)圖乙分析可知，過(guò)程①目的基因的獲取需選擇的限制酶是BamH1．過(guò)程④PCR技術(shù)需要使用的工具酶是熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）．
D．過(guò)程④PCR技術(shù)中可以根據(jù)編碼序列兩端的部分堿基序列設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增；運(yùn)用PCR擴(kuò)增DNA片段的原理是DNA雙鏈復(fù)制．
（2）將抗鹽基因?qū)�入煙草�?xì)胞內(nèi)，使煙草植株產(chǎn)生抗鹽性狀，這種新性狀（變異性狀）的來(lái)源屬于基因重組．如果將抗鹽基因直接導(dǎo)入煙草細(xì)胞，一般情況下，煙草不會(huì)具有抗鹽特性，原因是抗鹽基因在煙草細(xì)胞中不能復(fù)制，也不能表達(dá)．
故答案為：
（1）構(gòu)建基因表達(dá)載體（構(gòu)建重組DNA分子）
A．顯微注射
B．基因中啟動(dòng)子的堿基序列不能被轉(zhuǎn)錄
C．BamH1     熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）
D．引物      DNA雙鏈復(fù)制
（2）基因重組      復(fù)制       表達(dá)

點(diǎn)評(píng)：本題主要考查基因工程的原理和技術(shù)、PCR技術(shù)的原理和條件，意在考查考生的識(shí)圖能力和理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)，對(duì)生物學(xué)問(wèn)題作出準(zhǔn)確的判斷，難度適中．