Question

2．微生物誘變后的篩選環(huán)節(jié)極為繁雜，定向篩選常用來篩選營養(yǎng)缺陷型突變株．無氮MM培養(yǎng)基（基本培養(yǎng)基）僅能滿足野生型菌株生長需要，該培養(yǎng)基中營養(yǎng)缺陷型菌株能存活但不能繁殖．CM培養(yǎng)基（完全培養(yǎng)基）可滿足營養(yǎng)缺陷型菌株營養(yǎng)需要．已知青霉素能抑制細菌細胞壁的生物合成．據(jù)圖回答下列相關(guān)問題：
（1）據(jù)培養(yǎng)結(jié)果推測：1培養(yǎng)皿中是CM（或完全）培養(yǎng)基，2培養(yǎng)皿中是MM（或基本）培養(yǎng)基，MM培養(yǎng)基濃縮缺陷型后需洗滌和稀釋，才能涂平板進行母皿CM培養(yǎng)，假設(shè)只進行10^-1，10^-2和10^-3三級梯度稀釋，簡述獲得第三級梯度10^-3的操作步驟：從10^-2稀釋液中取樣1mL，加9 mL無菌水搖勻，棄去1 mL，即是10^-3梯度．
（2）誘變后篩選出的營養(yǎng)缺陷型菌株是在MM培養(yǎng)基上不生長，在CM培養(yǎng)基上能生長的菌落．為驗證該菌株是營養(yǎng)缺陷型，可以將菌株再次接種在MM和CM培養(yǎng)基，對比生長狀況．
（3）MM培養(yǎng)基加青霉素的目的是抑制細菌細胞壁的生物合成，用于淘汰野生型菌株，加青霉素后培養(yǎng)能濃縮缺陷型的原因是青霉素能抑制細胞壁的合成，野生型因能在MM培養(yǎng)基繁殖而被殺死（營養(yǎng)缺陷型因不能在MM培養(yǎng)基繁殖而被保留）．
（4）無氮MM培養(yǎng)基培養(yǎng)2小時的目的是保證誘變出的營養(yǎng)缺陷型不繁殖，防止營養(yǎng)缺陷型因分裂遭誤殺（或耗凈營養(yǎng)缺陷型在CM培養(yǎng)基中吸收的營養(yǎng)物質(zhì)）．

Answer 1

分析 由于青霉素能抑制細菌細胞壁的合成，野生型細菌生長繁殖活躍，合成細胞壁受阻而被殺死，缺陷型細菌處于休止狀態(tài)不進行細胞壁的合成，將誘變處理后的存活個體培養(yǎng)在含有青霉素的基本培養(yǎng)基中，可以淘汰大部分野生型菌株而“濃縮”缺陷型菌株．
閱讀題干和題圖知，本題是選擇培養(yǎng)營養(yǎng)缺陷型菌株菌種的過程，梳理微生物培養(yǎng)的相關(guān)知識點，根據(jù)問題的具體要求分析綜合做出解答．

解答 解：（1）無氮MM培養(yǎng)基（基本培養(yǎng)基）僅能滿足野生型菌株生長需要，該培養(yǎng)基中營養(yǎng)缺陷型菌株能存活但不能繁殖．CM培養(yǎng)基（完全培養(yǎng)基）可滿足營養(yǎng)缺陷型菌株營養(yǎng)需要．根據(jù)圖中顯示1號培養(yǎng)基上微生物數(shù)目較多，2號數(shù)目較少，可以推斷出：1培養(yǎng)皿中是CM（或完全）培養(yǎng)基，2培養(yǎng)皿中是MM（或基本）培養(yǎng)基．假設(shè)只進行10^-1，10^-2和10^-3三級梯度稀釋，可以用稀釋涂布平板法，獲得第三級梯度10^-3，具體操作步驟：從10^-2稀釋液中取樣1mL，加9 mL無菌水搖勻，棄去1 mL，即是10^-3梯度．
（2）由于CM培養(yǎng)基（完全培養(yǎng)基）可滿足營養(yǎng)缺陷型菌株營養(yǎng)需要．因此誘變后篩選出的營養(yǎng)缺陷型菌株在MM培養(yǎng)基上不生長，在CM培養(yǎng)基上能生長的菌落．為驗證該菌株是營養(yǎng)缺陷型，可以重復(fù)實驗，將菌株再次接種在MM和CM培養(yǎng)基，對比生長狀況．
（3）青霉素可以抑制細菌細胞壁的生物合成，用于淘汰野生型菌株．由于青霉素能抑制細胞壁的合成，野生型因能在MM培養(yǎng)基繁殖而被殺死（營養(yǎng)缺陷型因不能在MM培養(yǎng)基繁殖而被保留），因此加青霉素后培養(yǎng)能濃縮缺陷型．
（4）為了保證誘變出的營養(yǎng)缺陷型不繁殖，防止營養(yǎng)缺陷型因分裂遭誤殺（或耗凈營養(yǎng)缺陷型在CM培養(yǎng)基中吸收的營養(yǎng)物質(zhì)），無氮MM培養(yǎng)基培養(yǎng)2小時．
故答案為：
（1）CM（或完全）　MM（或基本）     從10^-2稀釋液中取樣1mL，加9 mL無菌水搖勻，棄去1 mL，即是10^-3梯度
（2）在MM培養(yǎng)基上不生長，在CM培養(yǎng)基上能生長的菌落        將菌株再次接種在MM和CM培養(yǎng)基，對比生長狀況
（3）抑制細菌細胞壁的生物合成，用于淘汰野生型菌株    青霉素能抑制細胞壁的合成，野生型因能在MM培養(yǎng)基繁殖而被殺死（營養(yǎng)缺陷型因不能在MM培養(yǎng)基繁殖而被保留）
（4）保證誘變出的營養(yǎng)缺陷型不繁殖，防止營養(yǎng)缺陷型因分裂遭誤殺（或耗凈營養(yǎng)缺陷型在CM培養(yǎng)基中吸收的營養(yǎng)物質(zhì)）

點評 本題的知識點是微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用，主要考查學(xué)生根據(jù)實驗?zāi)康�，利用所學(xué)的基本知識設(shè)計并完善實驗，分析實驗結(jié)果獲取結(jié)論的能力．