Question

生活飲用水巳經(jīng)過(guò)沉淀、過(guò)濾、加氯消毒等處理，含微生物很少，但當(dāng)其水源水不潔或處理達(dá)不到要求時(shí)，仍然會(huì)含相當(dāng)量的微生物甚至含有致病性微生物．供水管道破損及二次供水等環(huán)節(jié)也可能導(dǎo)致生活飲用水的污染．因此生活飲用水的微生物安全性日常檢測(cè)是很重要的．我國(guó)生活飲用水水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)（GB5749-85）中規(guī)定生活飲用水中細(xì)菌總數(shù)不得大于100個(gè)/mL，總大腸菌群不得大于3個(gè)/L．
（1）檢驗(yàn)大腸桿菌的含量時(shí)，通常將水樣進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)�然后將不同稀釋度的水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，記錄菌落數(shù)量，這種方法稱(chēng)為

 

．
（2）用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)是否需要設(shè)置對(duì)照組？為什么？

 

（3）如分別取0.1mL已稀釋10³倍的水樣分別涂布到四個(gè)瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)基記錄到大腸桿菌的菌落數(shù)分別為161、155、158、170，則每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為

 

．
（4）純化大腸桿菌時(shí)使用的培養(yǎng)基一般用

 

法滅菌，

 

（可/不可）用加入抗生素的方法防止雜菌感染．
（5）如果要測(cè)定水中的病毒種類(lèi)，可以用

 

技術(shù)使其遺傳物質(zhì)擴(kuò)增，然后用

 

技術(shù)進(jìn)行鑒定．

Answer 1

考點(diǎn)：微生物的分離和培養(yǎng)

專(zhuān)題：

分析：稀釋平板計(jì)數(shù)是根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上所形成的單個(gè)菌落，即是由一個(gè)單細(xì)胞繁殖而成這一培養(yǎng)特征設(shè)計(jì)的計(jì)數(shù)方法，即一個(gè)菌落代表一個(gè)單細(xì)胞．
計(jì)數(shù)時(shí)，首先將待測(cè)樣品制成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細(xì)胞分散開(kāi)，使成單個(gè)細(xì)胞存在（否則一個(gè)菌落就不只是代表一個(gè)細(xì)胞），再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內(nèi)．經(jīng)培養(yǎng)后，由單個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖形成菌落，統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目，即可計(jì)算出樣品中的含菌數(shù)．此法所計(jì)算的菌數(shù)是培養(yǎng)基上長(zhǎng)出來(lái)的菌落數(shù)，故又稱(chēng)活菌計(jì)數(shù)．

解答： 解：（1）對(duì)微生物的分離常用稀釋涂布平板法和平板劃線法進(jìn)行接種，但稀釋涂布平板法適用于微生物的計(jì)數(shù)．
（2）由于需要判斷培養(yǎng)基是否被污染，所以用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)需要設(shè)置對(duì)照組．
（3）每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為：（161+155+158+170）÷4×1000×10³=1.61×10⁸個(gè)．
（4）純化大腸桿菌時(shí)使用的培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌法滅菌，不可用加入抗生素的方法防止雜菌感染．
（5）如果要測(cè)定水中的病毒種類(lèi)，可以用PCR技術(shù)使其遺傳物質(zhì)擴(kuò)增，然后用DNA分子雜交技術(shù)進(jìn)行鑒定．
故答案為：
（1）稀釋涂布平板法
（2）需要，因?yàn)樾枰�判斷培養(yǎng)基是否被污染
（3）1.61×10⁸
（4）高壓蒸汽滅菌    不可
（5）PCR    DNA分子雜交

點(diǎn)評(píng)：本題旨在考查微生物的分離和培養(yǎng)、某種微生物數(shù)量的測(cè)定和培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇利用，意在考查具備驗(yàn)證簡(jiǎn)單生物學(xué)事實(shí)的能力，并能對(duì)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和結(jié)果進(jìn)行解釋、分析和處理，具有對(duì)一些生物學(xué)問(wèn)題進(jìn)行初步探究的能力．