Question

13．水污染是全球性的環(huán)境問題，微生物降解是水污染治理的有效手段之一．聚乙烯醇（PVA）是存在于化工污水中的一種難以降解的大分子有機物，PVA分解菌能產生PVA酶分解PVA，PVA與碘作用時能產生藍綠色復合物，當PVA被分解時藍綠色復合物消失，形成白色透明斑，請回答下列問題：
（1）如表是篩選出能高效分解PVA的細菌的培養(yǎng)基配方，表中X物質最可能為聚乙烯醇（或PVA）．實驗中還應設置完全培養(yǎng)液對照組，將菌液稀釋相同的倍數，對照組培養(yǎng)基上生長的菌落數目應明顯多于（填“多于”或“少于”選擇培養(yǎng)基上的數目，從而說明選擇培養(yǎng)基具有篩選作用．）

成分	MgSO4	蛋白質	X物質	水	瓊脂
用量	5g	10g	1000mL	7g	20g

（2）要測定土壤稀釋液中微生物的數目，可在顯微鏡下用血細胞（血球）計數板直接計數．若將100mL含有PVA分解菌的土壤樣品溶液稀釋10⁴倍后，取0.1mL稀釋液均勻涂布在選擇培養(yǎng)基表面，測得菌落數的平均值為160個，空白對照組平板上未出現菌落，則100mL原菌液中有PVA分解菌1.6×10⁹個，該方法的測量值與實際值相比一般會偏�。ㄌ睢捌�大”、“偏小”或“相等”）．
（3）要鑒定分離出的細菌是否為PVA分解菌，培養(yǎng)PVA分解菌的培養(yǎng)基中除了加入必需的營養(yǎng)物質外還需要加入碘用于鑒別PVA分解菌．若用上述培養(yǎng)基比較不同菌株降解PVA能力的大小，請用簡潔的語言寫出設計思路：用含相同PVA濃度的上述培養(yǎng)基來培養(yǎng)不同菌株，一定時間后，通過測定白色透明斑的大小（或直徑）來確定不同菌株降解PVA能力的大�。�

Answer 1

分析 1、選擇培養(yǎng)基是根據某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學、物理因素的抗性而設計的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌，從而提高該菌的篩選率．
2、微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經培養(yǎng)后可形成單個菌落．

解答 解：（1）分析題意可知，表格是篩選出能高效分解PVA的細菌的培養(yǎng)基配方，即該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，因此表中X物質最可能為聚乙烯醇（或PVA）．由于完全培養(yǎng)液中任何微生物都可以生長，因此對照組培養(yǎng)基上生長的菌落數目應明顯多于選擇培養(yǎng)基上的數目，從而說明選擇培養(yǎng)基具有篩選作用．
（2）要測定土壤稀釋液中微生物的數目，可在顯微鏡下用血細胞（血球）計數板直接計數．若將100mL含有PVA分解菌的土壤樣品溶液稀釋10⁴倍后，取0.1mL稀釋液均勻涂布在選擇培養(yǎng)基表面，測得菌落數的平均值為160個，空白對照組平板上未出現菌落，則100mL原菌液中有PVA分解菌=160÷0.1×10⁴×100=1.6×10⁹個；由于兩個或多個細菌聚集在一起只能產生一個菌落，因此該方法的測量值與實際值相比一般會偏�。�
（3）根據題意可知，“PVA與碘作用時能產生藍綠色復合物，當PVA被分解時藍綠色復合物消失，形成白色透明斑”，因此要鑒定分離出的細菌是否為PVA分解菌，培養(yǎng)PVA分解菌的培養(yǎng)基中還需要加入碘用于鑒別PVA分解菌．若用上述培養(yǎng)基比較不同菌株降解PVA能力的大小，可以用含相同PVA濃度的上述培養(yǎng)基來培養(yǎng)不同菌株，一定時間后，通過測定白色透明斑的大�。ɑ蛑睆剑﹣泶_定不同菌株降解PVA能力的大�。�
故答案為：
（1）聚乙烯醇（或PVA）      多于
（2）血細胞（血球）    1.6×10⁹     偏小
（3）碘          用含相同PVA濃度的上述培養(yǎng)基來培養(yǎng)不同菌株，一定時間后，通過測定白色透明斑的大�。ɑ蛑睆剑﹣泶_定不同菌株降解PVA能力的大小

點評 本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關知識，要求考生能夠題干信息確定PVA分解菌的分離方法，識記選擇培養(yǎng)基的選擇遠離，同時能夠結合所學知識設計實驗思路來比較不同菌株降解PVA能力的大�。�