Question

轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過程如圖所示：圖中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等為限制酶，質(zhì)粒和抗病基因上的箭頭表示限制酶的切割位點．下表是四種限制酶的識別序列及酶切位點．

限制酶	PstⅠ	SmaⅠ	EooRⅠ	ApaⅠ
識別序列及酶切位點

（1）若要獲得抗病基因，能否用限制酶SmaⅠ對圖中對應(yīng)的位點進行切割？

 

，說明由

 

．
要獲得含抗病基因的重組質(zhì)粒能否用PstⅠ、ApaⅠ限制酶切割質(zhì)粒？

 

．
（2）卡那霉素會抑制香蕉愈傷組織細胞的生長．欲利用含卡那霉素的培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入抗病基因的香蕉細胞，重組質(zhì)粒中應(yīng)同時含有

 

基因，作為標記基因．
（3）②、③階段是否可使用同種培養(yǎng)基？

 

；理由是

 

．
（4）已知④階段可以使用不添加任何植物激素的培養(yǎng)基即可生根，請根據(jù)所學(xué)知識給出理由：

 

．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術(shù),植物培養(yǎng)的條件及過程

專題：

分析：限制酶：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂．

解答： 解：（1）由抗病基因中酶切割位點可知，限制酶SmaⅠ的切割位點在抗病基因中間，對SmaⅠ位點進行切割破壞了抗病基因的結(jié)構(gòu)，所以不能用限制酶SmaⅠ．根據(jù)重組質(zhì)粒中目的基因的位置可知，切割質(zhì)粒用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ進行切割．所以不能用PstⅠ、ApaⅠ限制酶．
（2）根據(jù)題意，培養(yǎng)基中有卡那霉素，所以培養(yǎng)的微生物中要含有抗卡那霉素基因作用為標記基因．
（3）在植物組織培養(yǎng)的不同階段，培養(yǎng)基中激素種類、數(shù)量、比例不同，所以②③不能用同種培養(yǎng)基．
（4）④過程不需要添加植物激素，因為植物的芽能產(chǎn)生生長素，促進生根．
故答案為：
（1）不能   對SmaⅠ位點進行切割破壞了抗病基因的結(jié)構(gòu)      不能
（2）抗卡那霉素
（3）不能       兩階段培養(yǎng)基中激素種類、數(shù)量、比例不同
（4）因為芽能產(chǎn)生生長素，促進根的生長

點評：本題考查轉(zhuǎn)基因植物培育過程，要求學(xué)生理解限制酶的用法、識記激素對植物組織培養(yǎng)的作用．