Question

8．回答利用農(nóng)桿菌轉化法培育轉基因植物的相關問題
（1）培育轉基因植物過程的核心步驟是構建基因表達載體，其目的是使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并且可以通過復制遺傳給下一代，同時，使目的基因表達和發(fā)揮作用．
（2）組成基因表達載體的單體是脫氧（核糖）核苷酸，基因表達載體中的啟動子是RNA聚合酶識別和結合的部位．
（3）用兩種限制酶XbaI和SacI（兩種酶切出的黏性末端不同） 切割某DNA分子，獲得含目的基因的片段，若用該片段構建基因表達載體，應選用圖中的何種Ti質粒？甲

Answer 1

分析 農(nóng)桿菌轉化法（約80%的轉基因植物都是用這種方法獲得的）
1、農(nóng)桿菌轉化法的具體過程：
（1）利用土壤的Ti質粒構建基因表達載體，即將目的基因整合到土壤農(nóng)桿菌的Ti質粒上．
（2）將整合了目的基因的Ti質粒導入土壤農(nóng)桿菌細胞內(nèi)．
（3）利用土壤農(nóng)桿菌感染植物細胞，該過程實際上是將含有目的基因的土壤農(nóng)桿菌Ti質粒導入植物細胞內(nèi)．
（4）含有目的基因的土壤農(nóng)桿菌Ti質粒進入植物細胞后，可以把自己的一段基因整合到細胞核中的染色體上，這段基因中包含了目的基因．
2、原理：農(nóng)桿菌中的Ti質粒上的T-DNA可轉移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上．根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點，如果將目的基因插入到Ti質粒的T-DNA上，通過農(nóng)桿菌的轉化作用，就可以把目的基因整合到植物細胞中染色體的DNA上．
3、農(nóng)桿菌特點：易感染雙子葉植物和裸子植物，對單子葉植物沒有感染力；Ti質粒的T-DNA可轉移至受體細胞，并整合到受體細胞的染色體上．
4、轉化：目的基因插人Ti質粒的T-DNA上 農(nóng)桿菌→導入植物細胞→目的基因整合到植物細胞染色體上→目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達．

解答 解：（1）構建基因表達載體的目的是使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并且可以通過復制遺傳給下一代，同時，使目的基因表達和發(fā)揮作用．
（2）基因表達載體的本質是DNA，其基本組成單位是脫氧核苷酸；基因表達載體中的啟動子是RNA聚合酶識別和結合的部位，這種結合完成后才能驅動目的基因通過轉錄合成mRNA．
（3）用兩種限制酶XbaI和SacI（兩種酶切出的黏性末端不同）切割某DNA，獲得含目的基因的片段．
甲、該Ti質粒中含有限制酶XbaI和SacI的切割位點，且用這兩種酶切割可將目的基因插入T-DNA中，甲正確；
乙、該Ti質粒中不含限制酶SacI的切割位點，乙錯誤；
丙、該Ti質粒中含有限制酶XbaI和SacI的切割位點，但用這兩種酶切割不會將目的基因插入T-DNA中，丙錯誤；
丁、該Ti質粒中不含限制酶XbaI的切割位點，丁錯誤．
故選：甲．
故答案為：
（1）穩(wěn)定存在 
（2）脫氧（核糖）核苷酸    RNA聚合酶
（3）甲

點評 本題結合圖解，考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的操作工具、操作步驟，掌握各步驟中需要注意的細節(jié)問題，能結合所學的知識準確答題．