Question

3．胰島素是治療糖尿病的重要藥物．下圖是利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人胰島素的操作過(guò)程示意圖：

（1）圖中B的化學(xué)本質(zhì)是DNA．在⑥⑦過(guò)程中要用到的酶有DNA連接酶和限制性核酸內(nèi)切酶．
（2）確診糖尿病常用的方法是檢測(cè)尿液中是否含有葡萄糖，且空腹時(shí)的血糖濃度持續(xù)高于160mg/dl．
（3）不能用人的口腔上皮細(xì)胞來(lái)代替圖中的人胰島B細(xì)胞，這是因?yàn)榛�因是選擇性表達(dá)的．
限制性內(nèi)切酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-G^↓GATCC-，限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-^↓GATC-．在質(zhì)粒上有酶Ⅰ的一個(gè)切點(diǎn)，在目的基因的兩側(cè)各有一個(gè)酶Ⅱ的切點(diǎn)．
（4）請(qǐng)畫(huà)出質(zhì)粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端．
（5）請(qǐng)畫(huà)出目的基因兩側(cè)被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端．
（6）在DNA連接酶作用下，上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端也能連接，這是因?yàn)椋翰煌�限制酶切割后形成的黏性末端是相同的�?

Answer 1

分析 根據(jù)題意和圖示分析可知：圖示是利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)胰島素的操作過(guò)程示意圖．圖中①表示從胰島B細(xì)胞中獲取胰島素mRNA的過(guò)程；②為逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程，A為胰島素基因；③④⑤表示目的基因的擴(kuò)增過(guò)程；⑥表示用限制酶切割運(yùn)載體形成黏性末端的過(guò)程；⑦表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程；⑧表示將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的過(guò)程；⑨表示目的基因隨著受體細(xì)胞的增殖和擴(kuò)增；⑩是從培養(yǎng)液中獲取胰島素的過(guò)程．

解答 解：（1）運(yùn)載體的化學(xué)本質(zhì)的DNA，常用的極影工具酶是限制酶和DNA連接酶．
（2）確診糖尿病常用的方法是檢測(cè)尿液中是否含有葡萄糖，鑒定時(shí)常用斐林試劑，看是否出現(xiàn)磚紅色沉淀．
（3）由于在細(xì)胞分化過(guò)程中，基因是選擇性表達(dá)的，所以人的口腔上皮細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄出胰島素mRNA，因而不能利用口腔上皮細(xì)胞來(lái)完成①過(guò)程．
（4）質(zhì)粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端如圖所示：
．
（5）限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-^↓GATC-，因此目的基因兩側(cè)被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端為：．
（6）在DNA連接酶的作用下，上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的，所以能夠連接起來(lái)．
故答案為：（1）DNA  限制酶和DNA連接酶
（2）檢測(cè)尿液中是否含有葡萄糖
（3）基因是選擇性表達(dá)
（4）
（5）
（6）上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟，掌握基因工程各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)問(wèn)題；識(shí)記限制酶的作用特點(diǎn)，能結(jié)合限制性內(nèi)切酶Ⅰ和限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．