Question

綠色熒光蛋白基因（GFP）被發(fā)現(xiàn)以來，一直作為一個監(jiān)測完整細(xì)胞和組織內(nèi)基因表達(dá)及蛋白定位的理想標(biāo)記．根據(jù)右面的圖表回答下列問題：

（1）若圖中GFP的M端伸出的核苷酸的堿基序列是T↓TCGA，N端伸出的核苷酸的堿基序列是C↑TGCA，則在構(gòu)建含該GFP的重組質(zhì)粒A時，應(yīng)選用限制酶

 

，再對

 

進(jìn)行切割．
（2）若對符合設(shè)計要求的重組質(zhì)粒A進(jìn)行酶切，假設(shè)所用的酶均可將識別位點完全切開，請根據(jù)表中信息分析若采用BamHI 和PstI酶切，可得到

 

種DNA片段．
（3）檢測GFP是否已重組到豬胎兒成纖維細(xì)胞的染色體DNA上，可在熒光顯微鏡下觀察GFP的表達(dá)，圖中綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的轉(zhuǎn)基因操作中的GFP既是

 

 也是標(biāo)記基因．
（4）綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程中涉及到多項現(xiàn)代生物技術(shù)，圖中⑤⑥⑦的過程屬于

 

，而⑨過程屬于

 

（5）有人從未導(dǎo)入GFP基因的重組細(xì)胞發(fā)育成的早期胚胎中取得胚胎干細(xì)胞，并誘導(dǎo)分化為心臟并作為移植器官提供給人類，為避免免疫排斥反應(yīng)，可以導(dǎo)入某種調(diào)節(jié)因子，以

 

的表達(dá)，此時該調(diào)節(jié)因子可被稱作

 

基因．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術(shù),胚胎移植

專題：

分析：據(jù)圖分析，①表示獲取目的基因，②表示用限制酶切割質(zhì)粒，③表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，④表示將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，⑤表示將豬胎兒成纖維細(xì)胞提取細(xì)胞核，⑥表示將豬卵母細(xì)胞去除細(xì)胞核，⑦表示核移植，⑧表示動物細(xì)胞培養(yǎng)，⑨表示胚胎移植．

解答： 解：（1）從圖示可知，GFP的M端伸出的核苷酸的堿基序列是TTCGA，是限制酶HindⅢ酶的切割位點；N端伸出的核苷酸的堿基序列是CTGCA，是限制酶PstⅠ切割位點；則在構(gòu)建含該GFP的重組質(zhì)粒A時，應(yīng)選用限制酶HindⅢ和PstⅠ切割目的基因和Ti質(zhì)粒，再用DNA連接酶把目的基因和運載體相連．
（2）PstI可將重組質(zhì)粒的N端切開，而BamHⅠ能在重組質(zhì)粒的黑色部分切開，這樣就得到2種DNA．
（3）根據(jù)題意，將綠色熒光蛋白基因轉(zhuǎn)移到豬體中，所以GFP是目的基因．
（4）由圖可知，⑤⑥⑦過程為核移植過程，⑨過程將早期胚胎移入母豬體內(nèi)，屬于胚胎移植．
（5）根據(jù)題意，為避免免疫排斥反應(yīng)，所以導(dǎo)入的調(diào)節(jié)因子能抑制抗原基因的表達(dá)，導(dǎo)入的調(diào)節(jié)因子屬于目的基因．
故答案為：
（1）HindⅢ這PstⅠTi質(zhì)粒
（2）2
（3）目的基因
（4）核移植   胚胎移植
（5）抑制抗原基因    目的

點評：本題考查基因工程和胚胎工程，要求學(xué)生理解基因工程的操作步驟，能從課外材料中獲取相關(guān)的生物學(xué)信息，并能運用這些信息，結(jié)合所學(xué)知識解決相關(guān)的生物學(xué)問題．