Question

【題目】土壤有“微生物的天然培養(yǎng)基”之稱。下圖是某同學(xué)分離和培養(yǎng)土壤中微生物的部分操作步驟和實(shí)驗(yàn)結(jié)果示意圖。回答下列問題：

（1）利用固體培養(yǎng)基培養(yǎng)土壤中的微生物時(shí)，除考慮各種營養(yǎng)條件外，還需要控制的培養(yǎng)條件有_____（至少寫兩點(diǎn)）等。接種前應(yīng)該先檢測固體培養(yǎng)基是否被污染，檢測的具體方法是_____。

（2）圖示中用平板劃線法接種的操作順序是A→B→_____；以上操作步驟中存在明顯錯(cuò)誤的是_____（用字母表示），該操作的正確方法是_____。

（3）實(shí)驗(yàn)室利用平板劃線法來分離樣品中的目的菌時(shí)，每次劃線之前都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌，目的是_____。在第二次及以后劃線時(shí)，總是從上一次的末端開始劃線，這樣做的目的是_____。

Answer 1

【答案】溫度、pH、氧氣、無菌等 將未接種的培養(yǎng)基在適宜的環(huán)境中放置一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生 E→D→C→F C 在酒精燈的火焰旁劃線 殺滅上次劃線接種環(huán)上殘留的菌種 使菌種的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少，最終能夠得到單菌落

【解析】

據(jù)圖圖示為平板劃線操作：①挑取土壤含菌樣品：選用平整、圓滑的接種環(huán)，按無菌操作法挑取少量菌種。②劃A區(qū)：將平板倒置于煤氣（酒精）燈旁，左手拿出皿底并盡量使平板垂直于桌面，有培養(yǎng)基一面向著煤氣燈（這時(shí)皿蓋朝上，仍留在煤氣燈旁），右手拿接種環(huán)先在A區(qū)劃3﹣4條連續(xù)的平行線（線條多少應(yīng)依挑菌量的多少面定）。劃完A區(qū)后應(yīng)立即燒掉環(huán)上的殘菌，以免因菌過多而影響后面各區(qū)的分離效果。在燒接種環(huán)時(shí)，左手持皿底并將其覆蓋在皿蓋上方（不要放入皿蓋內(nèi)），以防止雜菌的污染。③劃其他區(qū)：將燒去殘菌后的接種環(huán)在平板培養(yǎng)基邊緣冷卻一下，并使B區(qū)轉(zhuǎn)到上方，接種環(huán)通過A區(qū)（菌源區(qū)）將菌帶到B區(qū)，隨即劃數(shù)條致密的平行線。再從B區(qū)作C區(qū)的劃線。最后經(jīng)C區(qū)作D區(qū)的劃線，D區(qū)的線條應(yīng)與A區(qū)平行，但劃D區(qū)時(shí)切勿重新接觸A、B區(qū)，以免極該兩區(qū)中濃密的菌液帶到D區(qū)，影響單菌落的形成。隨即將皿底放入皿蓋中。燒去接種環(huán)上的殘菌。④等平板凝固后，將平板倒置。因此，正確的順序?yàn)?/span>A→B→E→D→C→F。

（1）若用該培養(yǎng)基培養(yǎng)土壤中的微生物時(shí)，除考慮各種營養(yǎng)條件外，還要考慮溫度、pH、氧氣、無菌等和滲透壓等條件。檢測固體培養(yǎng)基是否被污染的方法是：將未接種的培養(yǎng)基在適宜的環(huán)境中放置一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。

（2）圖示是平板劃線法接種操作示意圖，由以上分析可知，其操作順序是A→B→E→D→C→F；為了防止雜菌污染，接種應(yīng)該在酒精燈的火焰旁進(jìn)行，因此以上操作中存在錯(cuò)誤的步驟是C

（3）平板劃線法操作時(shí)，次劃線之前都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌，目的是殺滅上次劃線接種環(huán)上殘留的菌種。在第二次及以后劃線時(shí)，總是從上一次的末端開始劃線，能夠使菌種的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少，最終能夠得到單菌落