Question

16．根據(jù)動(dòng)物細(xì)胞工程的有關(guān)知識(shí)回答下列問題
（1）進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常先用胰蛋白酶或膠原蛋白酶將組織分散成單個(gè)細(xì)胞；在培養(yǎng)過程中，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，其目的是防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成傷害．
（2）進(jìn)行動(dòng)物體細(xì)胞核移植時(shí)，一般都選用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中10代以內(nèi)的細(xì)胞作為供體細(xì)胞，選取這類細(xì)胞的理由是10代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的（二倍體）核型，細(xì)胞內(nèi)遺傳物質(zhì)不會(huì)發(fā)生突變．
（3）進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞融合時(shí)，誘導(dǎo)融合的化學(xué)試劑是聚乙二醇（PEG），該技術(shù)突破了有性雜交的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能．
（4）制備單克隆抗體時(shí)，需要將來自小鼠脾臟（細(xì)胞）產(chǎn)生的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合，誘導(dǎo)成功后所形成雜種細(xì)胞的特點(diǎn)是既能迅速大量繁殖（無限繁殖），又能產(chǎn)生專一抗體．

Answer 1

分析 1、取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)．
2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件：①無菌、無毒的環(huán)境；②營(yíng)養(yǎng)；③溫度和pH；④氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO₂．
3、單克隆抗體的制備流程：人工誘導(dǎo)經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，再經(jīng)篩選獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，通過培養(yǎng)獲得的雜交瘤細(xì)胞得到單克隆抗體．

解答 解：（1）胰蛋白酶或膠原蛋白酶將組織分散成單個(gè)細(xì)胞；在培養(yǎng)過程中，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，其目的是防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成傷害．
（2）進(jìn)行動(dòng)物體細(xì)胞核移植時(shí)，10代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的（二倍體）核型，細(xì)胞內(nèi)遺傳物質(zhì)不會(huì)發(fā)生突變，因此一般都選用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中10代以內(nèi)的細(xì)胞作為供體細(xì)胞．
（3）進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞融合時(shí)，誘導(dǎo)融合的化學(xué)試劑是聚乙二醇（PEG），該技術(shù)突破了有性雜交的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能．
（4）制備單克隆抗體時(shí)，需要將來自小鼠脾臟產(chǎn)生的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合，誘導(dǎo)成功后所形成雜種細(xì)胞，即雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一抗體．
故答案為：
（1）胰蛋白酶或膠原蛋白酶         防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成傷害
（2）10代以內(nèi)    10代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的（二倍體）核型，細(xì)胞內(nèi)遺傳物質(zhì)不會(huì)發(fā)生突變
（3）聚乙二醇（PEG）    遠(yuǎn)緣雜交
（4）脾臟（細(xì)胞）     既能迅速大量繁殖（無限繁殖），又能產(chǎn)生專一抗體

點(diǎn)評(píng) 本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和單克隆抗體的制備，要求考生識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程，是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件，識(shí)記誘導(dǎo)細(xì)胞融合的手段，理解單克隆抗體制備的過程，并結(jié)合所學(xué)知識(shí)判斷各小題，難度不大．