Question

【題目】大腸桿菌是寄生于人和動(dòng)物腸道中的細(xì)菌，其代謝產(chǎn)物能與染料伊紅美藍(lán)反應(yīng)，使菌落呈黑色。某生物科技小組的同學(xué)擬對(duì)某地嚴(yán)重污染的水體中細(xì)菌種類、大腸桿菌數(shù)目進(jìn)行調(diào)查，實(shí)驗(yàn)及流程如下：

實(shí)驗(yàn)一：濾膜法測(cè)定大腸桿菌數(shù)目：

用濾膜過濾待測(cè)水樣→水樣中的細(xì)菌留在濾膜上→將濾膜轉(zhuǎn)移到伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基（EMB培養(yǎng)基）上培養(yǎng)→統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目。

實(shí)驗(yàn)二：大腸桿菌的培養(yǎng)和分離：

配制培養(yǎng)基→滅菌→擴(kuò)大培養(yǎng)→劃線分離和培養(yǎng)→菌種保存。

回答下列問題：

（1）實(shí)驗(yàn)一中，過濾待測(cè)水樣需要用到濾杯、濾膜和濾瓶，通過________方法進(jìn)行滅菌處理。統(tǒng)計(jì)大腸桿菌菌落時(shí)應(yīng)選擇顏色為________的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)。

（2）實(shí)驗(yàn)二中，“劃線分離和培養(yǎng)”前應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行________，這樣，“劃線分離和培養(yǎng)”過程后，一個(gè)菌體便會(huì)形成一個(gè)________，這種分離方法是純化菌種的常用方法。

（3）實(shí)驗(yàn)一和實(shí)驗(yàn)二中均用到固體培養(yǎng)基，配制培養(yǎng)基過程中，除了加入特定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以外，還要加入一定量的氯化鈉，以維持培養(yǎng)基的________。獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是________，所以對(duì)所用培養(yǎng)基均需進(jìn)行滅菌處理，為檢測(cè)滅菌是否徹底，應(yīng)進(jìn)行的操作是________________________；一般對(duì)所需菌種長(zhǎng)期保存可采用________的方法。

Answer 1

【答案】高壓蒸汽滅菌 黑色 充分稀釋 （單）菌落 滲透壓 防止雜菌的污染 將未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生 甘油管藏

【解析】

濾膜法是檢測(cè)水樣中大腸細(xì)菌群的方法，將一定量水樣注入已滅菌的微孔薄膜的濾器中，經(jīng)過抽濾，細(xì)菌被截留在濾膜上，將濾膜貼于伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上，經(jīng)培養(yǎng)后計(jì)數(shù)和鑒定濾膜上生長(zhǎng)的大腸菌群菌落，依據(jù)過濾水樣計(jì)算每升或每100毫升水樣中的大腸菌群數(shù)；該方法操作簡(jiǎn)單、快速，主要適用于雜質(zhì)較少的水樣。

（1）實(shí)驗(yàn)一中，過濾待測(cè)水樣需要用到濾杯、濾膜和濾瓶，通過高壓蒸汽滅菌方法進(jìn)行滅菌處理。統(tǒng)計(jì)大腸桿菌菌落時(shí)應(yīng)選擇顏色為黑色的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)。

（2）實(shí)驗(yàn)二中，“劃線分離和培養(yǎng)”前應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行一定比例的稀釋，這樣，“劃線分離和培養(yǎng)”過程后，一個(gè)菌體便會(huì)形成一個(gè)菌落，這種分離方法是純化菌種的常用方法。

（3）實(shí)驗(yàn)一和實(shí)驗(yàn)二中均用到固體培養(yǎng)基，配制培養(yǎng)基過程中，除了加入特定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以外，還要加入一定量的氯化鈉，以維持培養(yǎng)基的滲透壓。獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是 防止雜菌污染，所以對(duì)所用培養(yǎng)基均需進(jìn)行滅菌處理，為檢測(cè)滅菌是否徹底，應(yīng)進(jìn)行的操作是將未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生；一般對(duì)所需菌種長(zhǎng)期保存可采用甘油管藏的方法。