Question

[生物--選修模塊3：現(xiàn)代生物科技技術]
如圖是培育表達人乳鐵蛋白的乳腺生物反應器的技術路線．圖中tet^R表示四環(huán)素抗性基因，amp^R表示氨芐青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直線所示為三種限制酶的酶切位點．

據圖回答：
（1）獲得人乳鐵蛋白基因的方法有

 

、

 

和根據已知蛋白質中的氨基酸序列推知基因的脫氧核苷酸序列再進行化學合成．
（2）圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體，需用

 

限制酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因．篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含

 

的培養(yǎng)基上進行．
（3）人乳鐵蛋白基因在乳腺細胞中特異性表達時RNA聚合酶識別和結合的位點是

 

（填字母代號），其合成的產物是

 

（添具體內容）．
A．啟動子         B．tet^R       C．復制原點         D．amp^R
（4）過程①可采用的操作方法是

 

（填字母代號）
A．農桿菌轉化     B．大腸桿菌轉化     C．顯微注射       D．細胞融合
（5）在體外培養(yǎng)受精卵時，除了給予一定量的O₂以維持細胞呼吸外，還需要提供

 

氣體以維持

 

．
（6）若對早期胚胎進行切割，經過程②可獲得多個新個體，這利用了細胞的

 

性．
（7）為檢測牛基因組中是否含有人乳鐵蛋白基因可采用

 

（填字母代號）技術
A．DNA分子雜交     B．基因序列分析     C．抗原-抗體雜交    D．PCR
（8）上述操作過程中采用的生物技術有

 

．

Answer 1

考點：基因工程的應用

專題：

分析：基因工程中獲取目的基因的方法有三種：從基因文庫中獲取目的基因、利用PCR技術擴增目的基因、人工合成法：包括反轉錄法和化學合成法．目的基因導入動物細胞的方法一般為顯微注射法．在動物細胞培養(yǎng)中需要一定的培養(yǎng)條件：無菌、無毒的環(huán)境；營養(yǎng)物質；適宜的溫度和PH；氣體環(huán)境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO₂，CO₂用于維持培養(yǎng)液的PH．目的基因分子水平的檢測方法：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．

解答： 解：（1）基因工程中獲取目的基因的方法有三種：從基因文庫中獲取目的基因、利用PCR技術擴增目的基因、人工合成法：包括反轉錄法和化學合成法．
（2）據圖，僅將人乳鐵蛋白基因切割下來，需要在人乳鐵蛋白基因的左側用BamHⅠ切割，右側用HindⅢ切割．當人乳鐵蛋白基因和質粒連接成重組質粒后，tet^R基因被人乳鐵蛋白基因隔開，不是完整的，而amp^R基因是完整的，所以篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進行．
（3）啟動子是RNA聚合酶特異性識別和結合的DNA序列，是基因的一個組成部分，控制基因表達（轉錄）的起始時間和表達的程度．RNA聚合酶作用于轉錄階段，轉錄的產物為mRNA．
（4）目的基因導入動物細胞的方法一般為顯微注射法．
（5）在動物細胞培養(yǎng)中需要一定的培養(yǎng)條件：無菌、無毒的環(huán)境；營養(yǎng)物質；適宜的溫度和PH；氣體環(huán)境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO₂，CO₂用于維持培養(yǎng)液的PH．
（6）若對早期胚胎進行切割，經胚胎移植可獲得多個新個體，這利用了細胞的全能性．
（7）檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因利用DNA分子雜交技術．
（8）上述操作過程中，首先利用基因工程技術將目的基因導入受精卵中，然后利用動物細胞培養(yǎng)技術將受精卵培養(yǎng)至桑葚胚或囊胚，再經胚胎移植技術將早期胚胎移植入代孕母牛子宮內．
故答案為：
（1）從基因文庫中獲取目的基因  利用PCR技術擴增目的基因
（2）HindⅢ和BamHⅠ氨芐青霉素
（3）A    人乳鐵蛋白基因轉錄產生的mRNA
（4）C
（5）CO₂；  培養(yǎng)液（基）的pH
（6）全能
（7）A
（8）轉基因技術  動物細胞培養(yǎng)   胚胎移植

點評：本題考查了基因工程、動物細胞培養(yǎng)等相關技術，意在考查考生能識記并理解所學知識的要點，把握知識間的內在聯(lián)系；綜合運用所學知識解決生物學問題的能力和從題目所給的圖形中獲取有效信息的能力．