Question

7．LB液體培養(yǎng)基和LB固體培養(yǎng)基是微生物實驗室中較常用的一種培養(yǎng)基，其配方為10g蛋白胨、10g/L酵母提取物、5g/L氯化鈉等，主要用于培養(yǎng)細菌、擴增菌種數量．某研究組開展了氧氣對微生物生長、繁殖的影響實驗，請回答下列問題：
（1）要配制供微生物生長、繁殖的培養(yǎng)基，其中一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽等．有些微生物對某些特殊營養(yǎng)物質及pH、氧氣等條件有特殊要求．
（2）將各類微生物用接種環(huán)從斜面培養(yǎng)基接種于滅菌過的LB液體培養(yǎng)基中，進行擴大化培養(yǎng)．
（3）將含有LB固體培養(yǎng)基（LB液體培養(yǎng)基中加15g瓊脂粉，剛配好，尚未凝固）的錐形瓶放入高壓蒸汽滅菌鍋中進行滅菌．滅菌完成后將錐形瓶取出，待溫度下降到60℃（不燙手的溫度）時，用酒精擦拭桌面和雙手，在超凈工作臺中的酒精燈火焰旁將錐形瓶中的LB培養(yǎng)基分裝到一系列試管，并做標記．
（4）當試管溫度下降到40℃（培養(yǎng)基還是液態(tài)）時，用滅菌過的移液器吸取0.1mL的各類微生物懸液加入相應試管中并封口，雙手快速搓動試管，使菌種均勻分布于培養(yǎng)基內后迅速將封口的試管放置在低溫條件下使培養(yǎng)基凝固．
（5）將上述試管放置于常溫條件下培養(yǎng)48小時后觀察實驗結果，如圖中可表示制作果酒的菌種的分布圖的是B．

Answer 1

分析 1、微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質以及氧氣的要求．對異養(yǎng)微生物來說，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營養(yǎng)要素成分時并不是起單一方面的作用．
2、無菌技術的主要內容：
①對實驗操作的空間、操作者的衣著和手，進行清潔和消毒；
②將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進行滅菌
③為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應在酒精燈火焰附近進行；
④實驗操作時應避免已經滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸．

解答 解：（1）要配制供微生物生長、繁殖的培養(yǎng)基，其中一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽等．有些微生物對某些特殊營養(yǎng)物質及pH、氧氣等條件有特殊要求．
（2）斜面培養(yǎng)基接種用接種環(huán)接種，對微生物進行擴大化培養(yǎng)．
（3）培養(yǎng)基一般采用高壓蒸汽滅菌法滅菌．滅菌完成后將錐形瓶取出，待溫度下降到60℃時，用酒精擦拭桌面和雙手，在超凈工作臺中的酒精燈火焰旁將錐形瓶中的LB培養(yǎng)基分裝到一系列試管，以防止雜菌污染．
（4）培養(yǎng)基凝固需要放置在低溫條件下．
（5）參與果酒制作的菌種是酵母菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)兼性厭氧型，因此圖中表示果酒制作菌種的圖是B．
故答案為：
（1）水、碳源、氮源     pH、氧氣
（2）接種環(huán)
（3）高壓蒸汽滅菌鍋   酒精   酒精燈火焰
（4）低溫
（5）B

點評 本題結合圖解，考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記培養(yǎng)基的成分，識記無菌技術及實例；識記參與果酒制作的微生物及其形成代謝類型，能結合所學的知識準確答題．