Question

人的HPRT基因缺陷（HPRT^-）細(xì)胞和小鼠的TK基因缺陷（TK^-）細(xì)胞在HAT培養(yǎng)基中都不能存活．雜種細(xì)胞在分裂中隨機(jī)丟失人的染色體，但保留所有的鼠染色體．因此，利用人-鼠細(xì)胞融合技術(shù)可以將人類基因定位于特定的染色體上．

（1）將人的HPRT^-細(xì)胞與小鼠的TK^-細(xì)胞用

 

促進(jìn)融合，然后培養(yǎng)在

 

培養(yǎng)基（HAT）中，最終篩選出人-鼠雜種細(xì)胞．
（2）將存活下來(lái)的雜種細(xì)胞進(jìn)行

 

培養(yǎng)，獲得不同的細(xì)胞株，用

 

染色后鏡檢，觀察結(jié)果如下：

細(xì)胞株編號(hào)	1	2	3	4	5	6
所含人染色體編號(hào)	11，14， 17，22	7，11， 14，17	5，7， 17，21	2，9， 11，17	5，17， 18，20	2，5， 17，19

由此可推測(cè)

 

基因在

 

染色體上．
（3）如果要確定人鳥(niǎo)苷酸（UMP）激酶基因所在染色體，應(yīng)選擇UMP激酶缺陷的

 

（填“人”或“鼠”）細(xì)胞與相應(yīng)細(xì)胞雜交，這樣的方法

 

（填“能”或“不能”）對(duì)小鼠的基因進(jìn)行定位．
（4）經(jīng)過(guò)基因測(cè)序發(fā)現(xiàn)UMP激酶缺陷是因?yàn)榫幋a它的基因中部的部分堿基替換造成的，結(jié)果可能導(dǎo)致

 

A．轉(zhuǎn)錄不能進(jìn)行                            B．合成的蛋白質(zhì)分子缺少部分氨基酸序列
C．合成的蛋白質(zhì)分子增加部分氨基酸序列         D．合成的蛋白質(zhì)分子氨基酸數(shù)目不變．

Answer 1

考點(diǎn)：動(dòng)物細(xì)胞與組織培養(yǎng)過(guò)程,基因突變的特征

專題：

分析：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過(guò)程：取動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物器官、組織．將材料剪碎，并用胰蛋白酶（或用膠原蛋白酶）處理（消化），形成分散的單個(gè)細(xì)胞，將處理后的細(xì)胞移入培養(yǎng)基中配成一定濃度的細(xì)胞懸浮液．懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，成為細(xì)胞貼壁．當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到互相接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，出現(xiàn)接觸抑制．此時(shí)需要將出現(xiàn)接觸抑制的細(xì)胞重新使用胰蛋白酶處理．再配成一定濃度的細(xì)胞懸浮液．

解答： 解：（1）將人的HPRT^-細(xì)胞與小鼠的TK^-細(xì)胞用PEG（或滅活病毒）促進(jìn)融合，然后培養(yǎng)在選擇培養(yǎng)基（HAT）中，最終篩選出人-鼠雜種細(xì)胞．
（2）將存活下來(lái)的雜種細(xì)胞進(jìn)行單克隆培養(yǎng)，獲得不同的細(xì)胞株，用堿性染料（或龍膽紫或醋酸洋紅）染色后鏡檢．根據(jù)表格中的數(shù)據(jù)可推測(cè)，TK基因在17染色體上．
（3）如果要確定人鳥(niǎo)苷酸（UMP）激酶基因所在染色體，應(yīng)選擇UMP激酶缺陷的鼠細(xì)胞與相應(yīng)細(xì)胞雜交，這樣的方法不能對(duì)小鼠的基因進(jìn)行定位．
（4）經(jīng)過(guò)基因測(cè)序發(fā)現(xiàn)UMP激酶缺陷是因?yàn)榫幋a它的基因中部的部分堿基替換造成的，結(jié)果可能導(dǎo)致B．合成的蛋白質(zhì)分子缺少部分氨基酸序列和D．合成的蛋白質(zhì)分子氨基酸數(shù)目不變．
故答案為：
（1）PEG（或滅活病毒）          選擇
（2）單克隆            堿性染料（或龍膽紫或醋酸洋紅）         TK        17
（3）鼠                       不能
（4）BD

點(diǎn)評(píng)：本題主要考查學(xué)生對(duì)知識(shí)的理解和分析能力．通過(guò)一定的選擇或純化方法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)的細(xì)胞稱為細(xì)胞株．當(dāng)培養(yǎng)超過(guò)50代時(shí)，大多數(shù)的細(xì)胞已經(jīng)衰老死亡，但仍有部分細(xì)胞發(fā)生了遺傳物質(zhì)的改變出現(xiàn)了無(wú)限傳代的特性，即癌變．此時(shí)的細(xì)胞被稱為細(xì)胞系．