Question

基因工程又叫做基因拼接技術(shù)．該技術(shù)能夠通過(guò)對(duì)生物的基因進(jìn)行改造和重新組合，產(chǎn)生出人類(lèi)所需要的基因產(chǎn)物．自20世紀(jì)70年代基因工程發(fā)展起來(lái)以后，人們開(kāi)始采用高新技術(shù)生產(chǎn)各種基因產(chǎn)品．下表中列出了幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)，圖1和圖2示基因工程部分操作過(guò)程：

限制酶	BamHⅠ	HindⅢ	EcoRⅠ	SmaⅠ
識(shí)別序列及切割位點(diǎn)	G↓GATCC CCTAG↑G	A↓AGCTT TTCGA↑A	G↓AATTC CTTAA↑G	CCC↓GGG GGG↑CCC

（1）從表中四種酶的切割位點(diǎn)看，可以切出平末端的酶是

 

．
（2）將目的基因與質(zhì)粒DNA縫合時(shí)，兩條鏈上的磷酸、脫氧核糖在

 

酶的作用下連接起來(lái)，形成磷酸二酯鍵；兩條鏈間的堿基對(duì)通過(guò)

 

連接起來(lái)．
（3）圖2中的質(zhì)粒分子可被表中

 

酶切割，切割后的質(zhì)粒含有

 

個(gè)游離的磷酸基團(tuán)．
（4）若對(duì)圖中質(zhì)粒進(jìn)行改造，插入的SmaⅠ酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越

 

．
（5）在相關(guān)酶的作用下，甲與乙能否拼接起來(lái)？并說(shuō)明理由：

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專(zhuān)題：

分析：限制酶：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂．

解答： 解：（1）由表格中四種限制酶切割位置可知，SmaⅠ可切出平末端．
（2）目的基因與質(zhì)粒縫合時(shí)用DNA連接酶進(jìn)行連接，形成磷酸二酯鍵，兩條鏈之間的堿基通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則形成氫鍵．
（3）根據(jù)質(zhì)粒的堿基序列可知，質(zhì)粒分子可被EcoRⅠ酶切割，切割后形成鏈狀DNA，有2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)．
（4）熱穩(wěn)定性越高的DNA分子中C-G配對(duì)越多，可知，SmaⅠ酶切割的序列中堿基對(duì)都是C-G，所以SmaⅠ酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越高．
（5）由圖可知，甲和乙的黏性末端相同，在DNA連接酶的作用下可以拼接起來(lái)．
故答案為：
（1）Sma I酶
（2）DNA連接     氫鍵
（3）EcoR I     2
（4）高
（5）能．二者具有相同的黏性末端

點(diǎn)評(píng)：本題考查基因工程相關(guān)知識(shí)，解題的關(guān)鍵是理解限制酶的作用特點(diǎn)．