Question

尿素是一種高濃度氮肥且長(zhǎng)期施用沒(méi)有不良影響，但尿素只有通過(guò)土壤中某些細(xì)菌分解為氨后，才能被植物吸收利用．分解尿素的細(xì)菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解．某同學(xué)要分離土壤中能分解尿素的細(xì)菌，并統(tǒng)計(jì)每克土壤樣品中活菌數(shù)目，培養(yǎng)基配方如下：

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4?7H2O	蛋白胨	葡萄糖	尿素	瓊脂
1.4 g	2.1g	0.2g	1.0g	10.0g	1.0g	15.0g

（1）根據(jù)培養(yǎng)基的成分判斷，該同學(xué)能否分離出土壤中分解尿素的細(xì)菌？

 

（能/不能），原因是

 

．
（2）要統(tǒng)計(jì)每克土壤樣品中活菌數(shù)目，宜采用

 

法接種，根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計(jì)平板上的

 

就能大約推測(cè)出樣品中活菌數(shù)．
（3）接種前要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行

 

處理．在整個(gè)微生物的分離和培養(yǎng)中，一定要注意在

 

條件下進(jìn)行．
（4）一同學(xué)在純化土壤中的細(xì)菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是

 

，應(yīng)當(dāng)怎樣操作才可避免此種現(xiàn)象？

 

．
（5）如果探究溫度對(duì)纖維素酶活性的影響，自變量是

 

，應(yīng)該保持

 

（至少答兩項(xiàng)）等不變．

Answer 1

考點(diǎn)：以尿素為氮源，測(cè)定能生長(zhǎng)的細(xì)菌的數(shù)量

專(zhuān)題：

分析：尿素分解菌體內(nèi)的脲酶能夠?qū)⑼寥乐械哪蛩胤纸鉃榘辈拍鼙恢参镂�收利用，尿素分解菌屬于�?xì)菌，篩選尿素分解菌需要使用以尿素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基．微生物篩選與培養(yǎng)的關(guān)鍵是無(wú)菌操作，常用的接種方法是稀釋涂布平板法和平板劃線(xiàn)法．

解答： 解：（1）據(jù)題表分析，表中的配方不能篩選分離出尿素分解菌，原因是沒(méi)有使用選擇培養(yǎng)基，即培養(yǎng)基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能選擇出只分解以尿素為氮源的微生物．
（2）稀釋涂布平板法接種常用來(lái)進(jìn)行微生物的計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)目可以推測(cè)出樣品中活菌數(shù)．
（3）培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌，微生物篩選與分離成功的關(guān)鍵是無(wú)菌操作．
（4）培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是菌液沒(méi)有梯度稀釋?zhuān)瑵舛冗^(guò)高．要避免此種現(xiàn)象需要對(duì)菌液進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)?br />（5）探究溫度對(duì)纖維素酶活性的影響實(shí)驗(yàn)中，溫度是自變量，纖維素的量與濃度、反應(yīng)時(shí)間、pH屬于無(wú)關(guān)變量，應(yīng)當(dāng)保持不變．
故答案為：
（1）不能，培養(yǎng)基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能選擇出只分解以尿素為氮源的微生物
（2）稀釋涂布平板，菌落數(shù)目  
（3）滅菌    無(wú)菌
（4）菌液濃度過(guò)高     對(duì)菌液進(jìn)行梯度稀釋
（5）溫度    纖維素的量與濃度、反應(yīng)時(shí)間、pH

點(diǎn)評(píng)：本題主要考查目的微生物的篩選與分離，意在強(qiáng)化學(xué)生對(duì)微生物篩選過(guò)程與分離的理解與運(yùn)用．