Question

尿素是一種高濃度氮肥且長期施用沒有不良影響，但尿素只有通過土壤中某些細菌分解為氨后，才能被植物吸收利用．分解尿素的細菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解．某同學要分離土壤中能分解尿素的細菌，并統(tǒng)計每克土壤樣品中活菌數(shù)目，培養(yǎng)基配方如下：

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4?7H2O	蛋白胨	葡萄糖	尿素	瓊脂
1.4 g	2.1g	0.2g	1.0g	10.0g	1.0g	15.0g

（1）根據(jù)培養(yǎng)基的成分判斷，該同學能否分離出土壤中分解尿素的細菌？

 

（能/不能），原因是

 

．
（2）要統(tǒng)計每克土壤樣品中活菌數(shù)目，宜采用

 

法接種，根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計平板上的

 

就能大約推測出樣品中活菌數(shù)．
（3）接種前要對培養(yǎng)基進行

 

處理．在整個微生物的分離和培養(yǎng)中，一定要注意在

 

條件下進行．
（4）一同學在純化土壤中的細菌時，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是

 

，應當怎樣操作才可避免此種現(xiàn)象？

 

．
（5）如果探究溫度對纖維素酶活性的影響，自變量是

 

，應該保持

 

（至少答兩項）等不變．

Answer 1

考點：以尿素為氮源，測定能生長的細菌的數(shù)量

專題：

分析：尿素分解菌體內(nèi)的脲酶能夠?qū)⑼寥乐械哪蛩胤纸鉃榘辈拍鼙恢参镂�收利用，尿素分解菌屬于細菌，篩選尿素分解菌需要使用以尿素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基．微生物篩選與培養(yǎng)的關鍵是無菌操作，常用的接種方法是稀釋涂布平板法和平板劃線法．

解答： 解：（1）據(jù)題表分析，表中的配方不能篩選分離出尿素分解菌，原因是沒有使用選擇培養(yǎng)基，即培養(yǎng)基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能選擇出只分解以尿素為氮源的微生物．
（2）稀釋涂布平板法接種常用來進行微生物的計數(shù)，統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)目可以推測出樣品中活菌數(shù)．
（3）培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌，微生物篩選與分離成功的關鍵是無菌操作．
（4）培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是菌液沒有梯度稀釋，濃度過高．要避免此種現(xiàn)象需要對菌液進行梯度稀釋．
（5）探究溫度對纖維素酶活性的影響實驗中，溫度是自變量，纖維素的量與濃度、反應時間、pH屬于無關變量，應當保持不變．
故答案為：
（1）不能，培養(yǎng)基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能選擇出只分解以尿素為氮源的微生物
（2）稀釋涂布平板，菌落數(shù)目  
（3）滅菌    無菌
（4）菌液濃度過高     對菌液進行梯度稀釋
（5）溫度    纖維素的量與濃度、反應時間、pH

點評：本題主要考查目的微生物的篩選與分離，意在強化學生對微生物篩選過程與分離的理解與運用．