Question

12．組織型纖溶酶原激活劑（tPA）在人體纖溶和凝血的平衡凋節(jié)中發(fā)揮著關(guān)鍵性的作用，科研人員現(xiàn)在能利用轉(zhuǎn)基因奶牛的乳汁生產(chǎn)組織型纖溶酶原激活劑（tPA）．回答下列相關(guān)問題：
（1）為了獲得更多的tPA基因，可對(duì)其進(jìn)行體外“克隆”，該技術(shù)指的是PCR技術(shù)．
（2）在構(gòu)建的基因表達(dá)載體中，應(yīng)將tPA基因首端與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件結(jié)合．將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞常用的方法是顯微注射法．
（3）在培育轉(zhuǎn)基因奶牛的過程中，應(yīng)取囊胚的滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行性別鑒定，選用雌性胚胎，通過胚胎移植技術(shù)，將早期胚胎移入代孕母牛的子宮內(nèi)．從個(gè)體水平上看，若轉(zhuǎn)基因牛的乳汁中產(chǎn)生組織型纖溶酶原激活劑，則可確定轉(zhuǎn)基因牛培育成功．
（4）若從囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)可分離出ES細(xì)胞，培養(yǎng)ES細(xì)胞時(shí)，培養(yǎng)液中加入分化誘導(dǎo)因子，可以分化為不同類型的細(xì)胞．

Answer 1

分析 1、PCR技術(shù)：
（1）PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)．
（2）PCR的原理是DNA復(fù)制，需要的條件包括：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）．
（3）PCR擴(kuò)增DNA的過程包括：高溫變性、低溫復(fù)性、中溫延伸過程．
2、“乳腺生物反應(yīng)器”的優(yōu)點(diǎn)是：
（1）動(dòng)物的基因組成和人類相似，從人類染色體上切下來的任何基因都可以直接轉(zhuǎn)移到動(dòng)物體內(nèi)．
（2）動(dòng)物乳腺細(xì)胞可以是任何基因正確表達(dá)，并正確進(jìn)行后加工．
（3）用動(dòng)物乳腺生產(chǎn)外源蛋白質(zhì)產(chǎn)量很高．用動(dòng)物乳腺生產(chǎn)藥品不需要產(chǎn)品提純，不需要復(fù)雜設(shè)備，動(dòng)物吃的是草，生產(chǎn)的是奶，奶中含有珍貴的蛋白質(zhì)，因此，“乳腺生物反應(yīng)器”是人們公認(rèn)的、最理想的生物反應(yīng)器．

解答 解：（1）基因工程中，在體外擴(kuò)增目的基因常利用PCR技術(shù)．
（2）要利用奶牛乳汁生產(chǎn)組織型纖溶酶原激活劑（tPA），在構(gòu)建的基因表達(dá)載體中，應(yīng)將tPA基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件結(jié)合，使目的基因在乳腺組織中特異性表達(dá)．將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞常用的方法是顯微注射法．
（3）在培育轉(zhuǎn)基因奶牛的過程中，奶牛必須是雌性的，應(yīng)取囊胚的滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行性別鑒定，選用雌性胚胎，通過胚胎移植技術(shù)，將早期胚胎移入代孕母牛的子宮內(nèi)．從個(gè)體水平上看，若轉(zhuǎn)基因牛的乳汁中產(chǎn)生組織型纖溶酶原激活劑，則可確定轉(zhuǎn)基因牛培育成功．
（4）若從囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)可分離出ES細(xì)胞，培養(yǎng)ES細(xì)胞時(shí)，培養(yǎng)液中加入分化誘導(dǎo)因子，可以分化為不同類型的細(xì)胞．
故答案為：
（1）PCR
（2）乳腺蛋白    顯微注射法
（3）性別    胚胎移植    轉(zhuǎn)基因牛的乳汁中產(chǎn)生組織型纖溶酶原激活劑
（4）分化誘導(dǎo)因子

點(diǎn)評(píng) 本題綜合考查基因工程、動(dòng)物體細(xì)胞核移植、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎移植等技術(shù)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟；識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞核移植和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理；識(shí)記胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)及基本程序，能準(zhǔn)確判斷圖中各過程的名稱，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)答題．