Question

西北農(nóng)業(yè)大學(xué)的科學(xué)家們將抗煙草花葉病毒的基因與土壤農(nóng)桿菌的質(zhì)粒進(jìn)行重組．下圖表示構(gòu)建重組質(zhì)粒和篩選含抗煙草花葉病毒基因的土壤農(nóng)桿菌的過程請(qǐng)據(jù)圖回答：

（1）構(gòu)建重組質(zhì)粒需要

 

酶，為了促進(jìn)重組質(zhì)粒導(dǎo)入土壤農(nóng)桿菌的過程，常用

 

處理土壤農(nóng)桿菌．
（2）分析圖中B、C兩個(gè)培養(yǎng)基上的菌落存活情況，含抗煙草花葉病毒基因的菌落位于（選填“B”或“C”）

 

上．
（3）將含有重組質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌．轉(zhuǎn)人煙草的葉肉細(xì)胞后，通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)成抗煙草花葉病毒的煙草植株，為檢測(cè)轉(zhuǎn)基因煙草是否抗煙草花葉病毒，可采用

 

的方法檢測(cè)煙草體內(nèi)是否含煙草花葉病毒的蛋白質(zhì)．若含有，則轉(zhuǎn)基因煙草不抗煙草花葉�。蝗舨缓�有，則轉(zhuǎn)基因煙草抗煙草花葉�。�

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：分析題圖：圖示表示構(gòu)建重組質(zhì)粒和篩選含抗煙草花葉病毒基因的土壤農(nóng)桿菌的過程，其中①②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，其中①過程需要限制酶，②過程需要DNA連接酶；③表示將重組質(zhì)粒導(dǎo)入土壤農(nóng)桿菌的過程；④和⑤表示篩選過程．

解答： 解：（1）構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，首先需要限制酶切割質(zhì)粒和含有目的基因的外源DNA分子，其次需要DNA連接酶將目的基因和質(zhì)粒連接形成重組質(zhì)粒；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞時(shí)，需要用CaCl₂處理微生物細(xì)胞，使之處于能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)，以便目的基因的導(dǎo)入．
（2）由圖可知，含有重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌能在含氯霉素的培養(yǎng)基上生存下來(lái)，但不能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生存下來(lái)，即含抗煙草花葉病毒基因的菌落位于C上．
（3）要檢測(cè)煙草體內(nèi)是否含煙草花葉病毒的蛋白質(zhì)，可采用抗原抗體雜交法．
故答案為：
（1）限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶     CaCl₂
（2）C
（3）抗原抗體雜交

點(diǎn)評(píng)：本題結(jié)合構(gòu)建重組質(zhì)粒和篩選含抗煙草花葉病毒基因的土壤農(nóng)桿菌的過程圖解，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的操作工具及其作用，掌握基因工程的操作步驟及其應(yīng)用，能正確分析題圖，并能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題．