Question

16．為從土壤中篩選能有效降解有機(jī)化合物X的細(xì)菌，研究人員用化合物X、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，成功地篩選出能高效降解化合物X的細(xì)菌（目的菌）．下圖是從土壤中篩選出該細(xì)菌的過(guò)程示意圖，下表是分離純化的結(jié)果．請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
記錄項(xiàng)目：透明圈直徑/菌落直徑

菌落編號(hào)	1	2	3
48小時(shí)	1.6	2.8	3.0
72小時(shí)	2.2	1.2	5.0
96小時(shí)	2.3	1.2	4.2

（1）培養(yǎng)基中的有機(jī)化合物X主要為目的菌提供碳源（或氮源、碳源）等營(yíng)養(yǎng)要素．從土壤中富集能有效降解有機(jī)化合物X的細(xì)菌時(shí)，應(yīng)選用液體（填“固體”或“液體”）培養(yǎng)基．
（2）配制成10^-1濃度稀釋液時(shí)，用無(wú)菌移液管從富集液的上清液中吸取1mL，移人盛有9 mL無(wú)菌水的試管中，并依次配制10 ^-2～10 ^-10的梯度稀釋液．
（3）在分離、純化過(guò)程中，圖中②、③過(guò)程接種的方法分別為稀釋涂布平板法、平板劃線法在倒平板前，應(yīng)對(duì)玻璃器皿和培養(yǎng)基滅菌，滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法．
（4）分析菌種的分離純化結(jié)果，應(yīng)選擇為3號(hào)菌落進(jìn)行擴(kuò)大生產(chǎn)，原因是透明圈直徑/菌落直徑越大，降解化合物X的能力越強(qiáng)．
（5）實(shí)驗(yàn)過(guò)程中還需配制空白培養(yǎng)基作為對(duì)照，其目的是檢驗(yàn)培養(yǎng)基和平板的滅菌是否合格．

Answer 1

分析 （1）實(shí)驗(yàn)室中目的菌株的篩選的原理：人為提供有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件（包括營(yíng)養(yǎng)、溫度．pH等），同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)．
（2）常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法．
（3）據(jù)圖分析：①是梯度稀釋?zhuān)�②是稀釋涂布平板法接種，③是平板劃線法接種．

解答 解：（1）由于用化合物X、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，成功地篩選出能高效降解化合物X的細(xì)菌（目地菌），所以該培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基．由于微生物的生長(zhǎng)需要水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源和生長(zhǎng)因子，所以化合X為目的菌提供碳源和氮源等營(yíng)養(yǎng)要素．從土壤中富集能有效降解有機(jī)化合物X的細(xì)菌時(shí)，應(yīng)選用液體培養(yǎng)基．
（2）進(jìn)行梯度稀釋時(shí)，配制成10^-1濃度稀釋液時(shí)，用無(wú)菌移液管從富集液的上清液中吸取1mL，移入盛有9mL無(wú)菌水的試管中，并依次配制10 ^-2～10 ^-10的梯度稀釋液．
（3）據(jù)圖分析，②的菌落均勻是稀釋涂布平板法接種，③的平板上有明顯的劃痕是平板劃線法接種．對(duì)玻璃器皿和培養(yǎng)基滅菌需要使用高壓蒸汽滅菌法滅菌．
（4）據(jù)表分析，3號(hào)菌落的透明圈直徑/菌落直徑最大，降解化合物X的能力最強(qiáng)，所以應(yīng)該使用3號(hào)菌落進(jìn)行擴(kuò)大生產(chǎn)．
（5）實(shí)驗(yàn)中空白培養(yǎng)基培養(yǎng)的目的是作為對(duì)照實(shí)驗(yàn)，以檢驗(yàn)培養(yǎng)基和平板的滅菌是否合格．
故答案為：
（1）碳源（或氮源、碳源）   液體
（2）9
（3）稀釋涂布平板法、平板劃線法    高壓蒸汽滅菌法
（4）3   透明圈直徑/菌落直徑越大，降解化合物X的能力越強(qiáng)
（5）檢驗(yàn)培養(yǎng)基和平板的滅菌是否合格

點(diǎn)評(píng) 本題的知識(shí)點(diǎn)是選擇培養(yǎng)基的選擇作用，目的菌的篩選、微生物的培養(yǎng)等知識(shí)，主要考查學(xué)生運(yùn)用微生物培養(yǎng)的知識(shí)解決生活中問(wèn)題的能力．