Question

科學(xué)家將人的生長(zhǎng)激素基因與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組，并成功地在大腸桿菌中得以表達(dá)．但在進(jìn)行基因工程的操作過(guò)程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，便于重組和篩選．已知限制酶（限制性核酸內(nèi)切酶）Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-G^↓GATCC-，限制酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-^↓GATC-，據(jù)圖回答：

（1）過(guò)程①表示的是采取

 

的方法來(lái)獲取目的基因．根據(jù)圖示分析，在構(gòu)建基因表達(dá)載體過(guò)程中，應(yīng)用限制酶

 

切割質(zhì)粒，用限制酶

 

酶切割目的基因．
（2）人的基因之所以能與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組，原因是

 

．人體與細(xì)菌共用一套密碼子，因此人的生長(zhǎng)激素基因能在細(xì)菌體內(nèi)成功表達(dá)．請(qǐng)寫出目的基因在細(xì)菌中表達(dá)的過(guò)程

 

．
（3）將得到的大腸桿菌B涂布在一個(gè)含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，能夠生長(zhǎng)的，說(shuō)明已導(dǎo)入了

 

，反之則沒(méi)有導(dǎo)入．
（4）若是培育轉(zhuǎn)基因植物，常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，農(nóng)桿菌的作用是

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：分析題圖：圖示表示利用基因工程培育抗蟲(chóng)棉過(guò)程，其中①表示通過(guò)人工合成法獲取目的基因；②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程，該過(guò)程需要限制酶和DNA連接酶；③表示將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞．

解答： 解：（1）圖中①表示采用反轉(zhuǎn)錄法（人工合成法）獲取目的基因；由圖可知，質(zhì)粒上的兩個(gè)標(biāo)記基因中均有限制酶Ⅰ（-↓GATC-）的識(shí)別序列和切點(diǎn)，若用該酶切割會(huì)將兩個(gè)標(biāo)記基因均破壞，因此只能用限制酶Ⅱ切割質(zhì)粒，但切割含有抗蟲(chóng)基因的外源DNA分子時(shí)可以只用限制酶Ⅰ，也可以同時(shí)用限制酶Ⅰ和限制酶Ⅱ．
（2）由于人的基因與大腸桿菌DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)相同，因此人的基因能與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組．目的基因在細(xì)菌中表達(dá)的過(guò)程：．
（3）用限制酶Ⅱ切割質(zhì)粒后會(huì)破四環(huán)素抗性基因，不會(huì)破壞氨芐青霉素抗性基因，因此能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存的大腸桿菌已經(jīng)成功導(dǎo)入普通質(zhì)粒或重組質(zhì)粒，反之則說(shuō)明沒(méi)有導(dǎo)入．
（4）將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其中農(nóng)桿菌的作用是感染植物，將目的基因轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞中．
故答案為：
（1）反轉(zhuǎn)錄法（人工合成法）ⅠⅡ堿基互補(bǔ)配對(duì)
（2）人的基因與大腸桿菌DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)相同

（3）普通質(zhì)�；蛑亟M質(zhì)粒
（4）農(nóng)桿菌可感染植物，將目的基因轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞中

點(diǎn)評(píng)：本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因棉花培育過(guò)程圖，考查基因工程、植物組織培養(yǎng)等知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的工程及操作步驟，能根據(jù)限制酶識(shí)別序列選擇合適的限制酶，并能準(zhǔn)確判斷圖中各過(guò)程的名稱，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．