Question

5．有些細菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染．某同學欲從污染的土壤中篩選出高效降解原油的菌株．回答問題：
（1）在篩選過程中，應將土壤樣品稀釋液接種于以原油為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（2）為了篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍分解圈的大小，分解圈大說明該菌株的降解能力強．
（3）通常情況下，在微生物培養(yǎng)過程中實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌．無菌技術要求試驗操作應在酒精燈火焰附近進行，以避免周圍環(huán)境中微生物的污染．
（4）分解尿素的細菌合成的脲酶將尿素分解為氨，使培養(yǎng)基的堿性增強．利用這一原理對菌種進行鑒定，方法是在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑培養(yǎng)細菌，若指示劑變紅，說明該種細菌能夠分解尿素．
（5）某同學用稀釋涂布平板法測定水樣中的大腸桿菌的含量時，在3個平板上用稀釋涂布平板法接入稀釋倍數(shù)為10⁴稀釋液0.2mL，經(jīng)適當培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為51、52和53．則每升水樣中大腸桿菌數(shù)為2.6×10⁹．

Answer 1

分析 （1）培養(yǎng)基的營養(yǎng)構成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽．培養(yǎng)基的分類：①按物理性質(zhì)分，分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基中含有凝固劑，一般是瓊脂．②按化學成分分，分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)．兩者的區(qū)別是天然培養(yǎng)基成分不確定，合成培養(yǎng)基成分的含量是確定的．③按用途分，分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基．選擇培養(yǎng)基主要是培養(yǎng)、分離特定的微生物，培養(yǎng)酵母菌可在培養(yǎng)基中加入青霉素；鑒別培養(yǎng)基可以鑒定不同的微生物，比如鑒別飲用水中是否含有大腸桿菌，可以用伊紅-美藍培養(yǎng)基，如果菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤，說明有大腸桿菌．
（2）常用滅菌方法：灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法．
培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實驗操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌和消毒方法依次：高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌、化學消毒、紫外線滅菌、巴氏消毒法．
（3）接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細胞，并在培養(yǎng)基表面形成單個細菌繁殖而成的子細胞群體--菌落．

解答 解：（1）欲篩選出能降解原油的菌株，培養(yǎng)基中應只含有原油而無其它碳源，不能降解原油的細菌在此培養(yǎng)基上不能生存，這類培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（2）降解原油能力越強的菌株，在菌落周圍形成的分解圈越大．
（3）實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌（如接種環(huán)）、干熱滅菌（如培養(yǎng)皿）、高壓蒸汽滅菌（如培養(yǎng)基）等．無菌操作要求在整個實驗過程中操作都在酒精燈火焰附近進行，以避免周圍微生物的污染．
（4）分解尿素的細菌合成的脲酶將尿素分解為氨，使培養(yǎng)基的堿性增強．利用這一原理對菌種進行鑒定，方法是在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入 酚紅 指示劑培養(yǎng)細菌，若指示劑變紅，說明該種細菌能夠分解尿素．
（5）某同學用稀釋涂布平板法測定水樣中的大腸桿菌的含量時，在3個平板上用稀釋涂布平板法接入稀釋倍數(shù)為10⁴稀釋液0.2mL，經(jīng)適當培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為51、52和53．則每升水樣中大腸桿菌數(shù)為（51+52+53）÷3÷0.2×10⁴×10³=2.6×10⁹．
故答案為：
（1）原油    選擇        
（2）強
（3）干熱滅菌   高壓蒸汽滅菌    酒精燈火焰
（4）尿素    酚紅   該種細菌能夠分解尿素
（5）2.6×10⁹

點評 本題主要考查微生物培養(yǎng)的一些基本操作，意在加深學生對相關知識點的識記與理解．