Question

20．炭疽桿菌是一類需氧芽胞桿菌，其代謝過程會(huì)將大量的代謝產(chǎn)物排出胞外．由炭疽桿菌引起的炭疽病是一種人畜共患、死亡率較高的急性傳染�。畬�(duì)炭疽病疑似患者，可根據(jù)噬菌體的宿主專一性，通過如圖所示的實(shí)驗(yàn)確診．請據(jù)圖回答下列問題：

（1）噬菌體的主要化學(xué)成分是DNA和蛋白質(zhì)，上述實(shí)驗(yàn)中噬菌體與炭疽桿菌的種間關(guān)系屬于寄生．
（2）微生物接種的方法很多，最常用的是稀釋涂布平板法和平板劃線法，經(jīng)上述方法獲得的純種微生物如需長期保存，可采用甘油管藏的方法．
（3）②是將分離培養(yǎng)獲得的可疑菌挑選出來進(jìn)行接種，此過程中對(duì)配制的液體培養(yǎng)基等需采取的滅菌方法是高壓滅菌，該培養(yǎng)基所用的碳源為有機(jī)碳（無機(jī)碳/有機(jī)碳）．
（4）在過程⑧中細(xì)菌大量繁殖，并因?yàn)榇�謝產(chǎn)物的積累而使液體培養(yǎng)基變渾濁．取培養(yǎng)后的等量菌液加入A、B試管，再將如圖處理后的兩試管放在35℃環(huán)境下培養(yǎng)6小時(shí)后觀察，若實(shí)驗(yàn)組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對(duì)照組低（高或低），則證明疑似患者被炭疽桿菌感染；反之則排除．

Answer 1

分析 1、噬菌體是專門寄生在細(xì)菌體內(nèi)的病毒，該病毒是由DNA和蛋白質(zhì)組成的．
2、接種方法：平板劃線法和稀釋涂布法．
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落．能夠測定樣品中活菌數(shù)的方法是：稀釋涂布平板法．
3、無菌技術(shù)的主要內(nèi)容
①對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手，進(jìn)行清潔和消毒；
②將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行滅菌
③為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行；
④實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸．

解答 解：（1）噬菌體的主要化學(xué)成分是DNA和蛋白質(zhì)，噬菌體是專門寄生在細(xì)菌體內(nèi)的病毒，因此上述實(shí)驗(yàn)中噬菌體與炭疽桿菌的種間關(guān)系屬于寄生．
（2）微生物接種的方法很多，最常用的是稀釋涂布平板法和平板劃線法，經(jīng)上述方法獲得的純種微生物如需長期保存，可采用甘油管藏的方法．
（3）②是將分離培養(yǎng)獲得的可疑菌挑選出來進(jìn)行接種，此過程中對(duì)配制的液體培養(yǎng)基等需采取的滅菌方法是高壓滅菌．由于炭疽桿菌屬于異養(yǎng)生物，因此該培養(yǎng)基所用的碳源為有機(jī)碳．
（4）在過程③中細(xì)菌大量繁殖，并因?yàn)榇�謝產(chǎn)物的積累而使液體培養(yǎng)基變渾濁．取培養(yǎng)后的等量菌液加入A、B試管，再將如圖處理后的兩試管放在35℃環(huán)境下培養(yǎng)6小時(shí)后觀察，由于噬菌體在繁殖過程中會(huì)使大量的細(xì)菌死亡，因此若實(shí)驗(yàn)組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對(duì)照組低，則證明疑似患者被炭疽桿菌感染；反之則排除．
故答案為：
（1）DNA和蛋白質(zhì)    寄生
（2）稀釋涂布平板法和平板劃線法    甘油管藏
（3）高壓滅菌    有機(jī)碳
（4）代謝產(chǎn)物    低

點(diǎn)評(píng) 本題主要考查微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求考生能夠識(shí)記噬菌體的組成以及代謝特點(diǎn)，掌握微生物分離、培養(yǎng)、滅菌以及保存的相關(guān)方法，能夠根據(jù)微生物的代謝類型確定培養(yǎng)的成分．