Question

4．如圖是將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞，培育轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的常用操作程序．根據(jù)圖示過(guò)程和所學(xué)知識(shí)，將下面操作程序補(bǔ)充完整．
（1）構(gòu)建基因表達(dá)載體：在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)常要用到限制酶、DNA連接酶兩種工具酶．如果目的基因要在乳腺細(xì)胞中表達(dá)，基因表達(dá)載體構(gòu)建時(shí)要將目的基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子、標(biāo)記基因和終止子等組件重組在一起，其中標(biāo)記基因的作用是鑒定目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞并將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)．
（2）獲得足夠數(shù)量的受精卵：為了獲得足夠數(shù)量的受精卵，先利用促性腺激素刺激供體雌性鼠超數(shù)排卵．雌鼠經(jīng)過(guò)交配，將受精卵從輸卵管中取出．
（3）將目的基因?qū)�入�?xì)胞：通常采用顯微注射技術(shù)將目的基因?qū)�入受精卵�?br />（4）早期胚胎培養(yǎng)：早期胚胎培養(yǎng)的培養(yǎng)液成分一般比較復(fù)雜，除一些無(wú)機(jī)鹽和有機(jī)鹽外，還需要添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營(yíng)養(yǎng)成分，以及動(dòng)物血清等物質(zhì)．當(dāng)胚胎培養(yǎng)到適宜的階段時(shí)，可進(jìn)行胚胎移植．
（5）胚胎移植：在胚胎移植前要對(duì)接受胚胎的受體進(jìn)行同期發(fā)情處理．移植后，還要對(duì)受體雌鼠進(jìn)行妊娠檢查．
（6）轉(zhuǎn)基因鼠的檢測(cè)：經(jīng)過(guò)一段時(shí)間妊娠后，產(chǎn)下一群小鼠，為了檢測(cè)哪些是轉(zhuǎn)基因鼠，可以用放射性同位素等標(biāo)記目的基因作探針，進(jìn)行DNA分子雜交檢測(cè)．

Answer 1

分析 基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲�、诨�因表達(dá)載體的構(gòu)建③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞④目的基因的檢測(cè)與鑒定．
DNA重組技術(shù)至少需要三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運(yùn)載體．
探針就是用放射性同位素（或熒光分子）標(biāo)記的含有目的基因DNA片段．

解答 解：（1）構(gòu)建基因表達(dá)載體：在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)常要用到限制酶、DNA連接酶兩種工具酶．如果目的基因要在乳腺細(xì)胞中表達(dá)，基因表達(dá)載體構(gòu)建時(shí)要將目的基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子、標(biāo)記基因和終止子等組件重組在一起．標(biāo)記基因具有鑒定目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞并將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)．
（2）為了獲得足夠數(shù)量的受精卵，先利用促性腺激素刺激供體雌性鼠超數(shù)排卵．雌鼠經(jīng)過(guò)交配，將受精卵從輸卵管中取出．
（3）通常采用顯微注射技術(shù)將目的基因?qū)�入受精卵�?br />（4）早期胚胎培養(yǎng)的培養(yǎng)液成分一般比較復(fù)雜，除一些無(wú)機(jī)鹽和有機(jī)鹽外，還需要添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營(yíng)養(yǎng)成分，以及動(dòng)物血清等物質(zhì)．當(dāng)胚胎培養(yǎng)到適宜的階段時(shí)，可進(jìn)行胚胎移植．
（5）在胚胎移植前要對(duì)接受胚胎的受體進(jìn)行發(fā)情處理．移植后，還要對(duì)受體雌鼠進(jìn)行妊娠檢查．
（6）經(jīng)過(guò)一段時(shí)間妊娠后，產(chǎn)下一群小鼠，為了檢測(cè)哪些是轉(zhuǎn)基因鼠，可以用發(fā)射性同位素標(biāo)記目的基因制作探針，進(jìn)行DNA分子雜交檢測(cè)．
故答案為：
（1）限制酶、DNA連接酶    乳腺蛋白基因      鑒定目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞并將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)
（2）促性腺激素
（3）顯微注射
（4）動(dòng)物血清
（5）同期發(fā)情
（6）放射性同位素等標(biāo)記目的基因

點(diǎn)評(píng) 本題考查了基因工程、胚胎工程、細(xì)胞工程等方面的知識(shí)，意在考查考生的識(shí)記能力和知識(shí)遷移能力，具有一定的綜合性．考生要能夠識(shí)記基因工程的操作工具；識(shí)記胚胎工程中的超數(shù)排卵的方法；識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)及成分等．