Question

4．如圖是將目的基因?qū)�入動物細胞，培育轉(zhuǎn)基因動物的常用操作程序．根據(jù)圖示過程和所學知識，將下面操作程序補充完整．
（1）構建基因表達載體：在構建基因表達載體時常要用到限制酶、DNA連接酶兩種工具酶．如果目的基因要在乳腺細胞中表達，基因表達載體構建時要將目的基因與乳腺蛋白基因的啟動子、標記基因和終止子等組件重組在一起，其中標記基因的作用是鑒定目的基因是否導入受體細胞并將含有目的基因的細胞篩選出來．
（2）獲得足夠數(shù)量的受精卵：為了獲得足夠數(shù)量的受精卵，先利用促性腺激素刺激供體雌性鼠超數(shù)排卵．雌鼠經(jīng)過交配，將受精卵從輸卵管中取出．
（3）將目的基因?qū)�入細胞：通常采用顯微注射技術將目的基因?qū)�入受精卵�?br />（4）早期胚胎培養(yǎng)：早期胚胎培養(yǎng)的培養(yǎng)液成分一般比較復雜，除一些無機鹽和有機鹽外，還需要添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分，以及動物血清等物質(zhì)．當胚胎培養(yǎng)到適宜的階段時，可進行胚胎移植．
（5）胚胎移植：在胚胎移植前要對接受胚胎的受體進行同期發(fā)情處理．移植后，還要對受體雌鼠進行妊娠檢查．
（6）轉(zhuǎn)基因鼠的檢測：經(jīng)過一段時間妊娠后，產(chǎn)下一群小鼠，為了檢測哪些是轉(zhuǎn)基因鼠，可以用放射性同位素等標記目的基因作探針，進行DNA分子雜交檢測．

Answer 1

分析 基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲�、诨�因表達載體的構建③將目的基因?qū)�入受體細胞④目的基因的檢測與鑒定．
DNA重組技術至少需要三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運載體．
探針就是用放射性同位素（或熒光分子）標記的含有目的基因DNA片段．

解答 解：（1）構建基因表達載體：在構建基因表達載體時常要用到限制酶、DNA連接酶兩種工具酶．如果目的基因要在乳腺細胞中表達，基因表達載體構建時要將目的基因與乳腺蛋白基因的啟動子、標記基因和終止子等組件重組在一起．標記基因具有鑒定目的基因是否導入受體細胞并將含有目的基因的細胞篩選出來．
（2）為了獲得足夠數(shù)量的受精卵，先利用促性腺激素刺激供體雌性鼠超數(shù)排卵．雌鼠經(jīng)過交配，將受精卵從輸卵管中取出．
（3）通常采用顯微注射技術將目的基因?qū)�入受精卵�?br />（4）早期胚胎培養(yǎng)的培養(yǎng)液成分一般比較復雜，除一些無機鹽和有機鹽外，還需要添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分，以及動物血清等物質(zhì)．當胚胎培養(yǎng)到適宜的階段時，可進行胚胎移植．
（5）在胚胎移植前要對接受胚胎的受體進行發(fā)情處理．移植后，還要對受體雌鼠進行妊娠檢查．
（6）經(jīng)過一段時間妊娠后，產(chǎn)下一群小鼠，為了檢測哪些是轉(zhuǎn)基因鼠，可以用發(fā)射性同位素標記目的基因制作探針，進行DNA分子雜交檢測．
故答案為：
（1）限制酶、DNA連接酶    乳腺蛋白基因      鑒定目的基因是否導入受體細胞并將含有目的基因的細胞篩選出來
（2）促性腺激素
（3）顯微注射
（4）動物血清
（5）同期發(fā)情
（6）放射性同位素等標記目的基因

點評 本題考查了基因工程、胚胎工程、細胞工程等方面的知識，意在考查考生的識記能力和知識遷移能力，具有一定的綜合性．考生要能夠識記基因工程的操作工具；識記胚胎工程中的超數(shù)排卵的方法；識記動物細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)及成分等．