Question

(10分）肺細胞中的let7基因表達減弱,癌基因RAS表達增強,會引發(fā)肺癌。研究人員利用基因工程技術(shù)將let7基因?qū)�入肺癌細胞實現(xiàn)表達,發(fā)現(xiàn)肺癌細胞的增殖受到抑制。該基因工程技術(shù)基本流程如圖1。

 

請回答

(1)進行過程①時,需用　　　　酶切開載體以插入let7基因。載體應(yīng)有RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位,以驅(qū)動let7基因轉(zhuǎn)錄,該部位稱為　　　　。

(2)進行過程②時,需用　　　　酶處理貼附在培養(yǎng)皿壁上的細胞,以利于傳代培養(yǎng)。

(3)研究發(fā)現(xiàn),let7基因能影響癌基因RAS的表達,其影響機理如圖2。據(jù)圖分析,可從細胞中提取　　　　進行分子雜交,以直接檢測let7基因是否轉(zhuǎn)錄。肺癌細胞增殖受到抑制,可能是由于細胞中　　　　(RAS mRNA/RAS蛋白)含量減少引起的。

 

Answer 1

⑴限制酶 啟動子 ⑵胰蛋白 ⑶RNA RAS蛋白

【解析】

試題分析：（1）過程①表示基因表達載體的構(gòu)建，在該過程中需要用限制性核酸內(nèi)切酶（簡稱限制酶）對載體進行切割，以便于目的基因的插入；啟動子是一段特殊的DNA序列，是RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點，RNA聚合酶結(jié)合到該位點，可驅(qū)動轉(zhuǎn)錄過程．⑵進行傳代培養(yǎng)時，需要用胰蛋白酶處理細胞，接觸細胞的接觸抑制現(xiàn)象。⑶判斷目的基因是否在受體細胞中轉(zhuǎn)錄，可用分子雜交技術(shù)來檢測，從細胞中提取mRNA和用放射性同位素或者熒光標記的目的基因單鏈DNA片段進行雜交．根據(jù)題中信息“肺細胞中的let-7基因表達減弱，癌基因RAS表達增強，會引發(fā)肺癌”知，導(dǎo)入let-7基因后，肺癌細胞的增殖受到抑制；據(jù)圖2可知，let-7基因影響RAS基因表達的機理是：let-7基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物miRNA與RAS基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物RAS mRNA結(jié)合，使RAS基因翻譯受到抑制，引起細胞中的RAS蛋白含量減少，進而導(dǎo)致癌細胞增殖受到抑制．

考點：本題主要考查基因工程和基因的表達，意在考查考生能理解所學(xué)知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系和能用文字、圖表以及數(shù)學(xué)方式等多種表達形式準確地描述生物學(xué)方面的內(nèi)容的能力。