Question

(10分）肺細(xì)胞中的let7基因表達(dá)減弱,癌基因RAS表達(dá)增強(qiáng),會(huì)引發(fā)肺癌。研究人員利用基因工程技術(shù)將let7基因?qū)敕伟┘?xì)胞實(shí)現(xiàn)表達(dá),發(fā)現(xiàn)肺癌細(xì)胞的增殖受到抑制。該基因工程技術(shù)基本流程如圖1。

 

請(qǐng)回答

(1)進(jìn)行過(guò)程①時(shí),需用　　　　酶切開(kāi)載體以插入let7基因。載體應(yīng)有RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,以驅(qū)動(dòng)let7基因轉(zhuǎn)錄,該部位稱為　　　　。

(2)進(jìn)行過(guò)程②時(shí),需用　　　　酶處理貼附在培養(yǎng)皿壁上的細(xì)胞,以利于傳代培養(yǎng)。

(3)研究發(fā)現(xiàn),let7基因能影響癌基因RAS的表達(dá),其影響機(jī)理如圖2。據(jù)圖分析,可從細(xì)胞中提取　　　　進(jìn)行分子雜交,以直接檢測(cè)let7基因是否轉(zhuǎn)錄。肺癌細(xì)胞增殖受到抑制,可能是由于細(xì)胞中　　　　(RAS mRNA/RAS蛋白)含量減少引起的。

 

Answer 1

⑴限制酶 啟動(dòng)子 ⑵胰蛋白 ⑶RNA RAS蛋白

【解析】

試題分析：（1）過(guò)程①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，在該過(guò)程中需要用限制性核酸內(nèi)切酶（簡(jiǎn)稱限制酶）對(duì)載體進(jìn)行切割，以便于目的基因的插入；啟動(dòng)子是一段特殊的DNA序列，是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)，RNA聚合酶結(jié)合到該位點(diǎn)，可驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄過(guò)程．⑵進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)，需要用胰蛋白酶處理細(xì)胞，接觸細(xì)胞的接觸抑制現(xiàn)象。⑶判斷目的基因是否在受體細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄，可用分子雜交技術(shù)來(lái)檢測(cè)，從細(xì)胞中提取mRNA和用放射性同位素或者熒光標(biāo)記的目的基因單鏈DNA片段進(jìn)行雜交．根據(jù)題中信息“肺細(xì)胞中的let-7基因表達(dá)減弱，癌基因RAS表達(dá)增強(qiáng)，會(huì)引發(fā)肺癌”知，導(dǎo)入let-7基因后，肺癌細(xì)胞的增殖受到抑制；據(jù)圖2可知，let-7基因影響RAS基因表達(dá)的機(jī)理是：let-7基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物miRNA與RAS基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物RAS mRNA結(jié)合，使RAS基因翻譯受到抑制，引起細(xì)胞中的RAS蛋白含量減少，進(jìn)而導(dǎo)致癌細(xì)胞增殖受到抑制．

考點(diǎn)：本題主要考查基因工程和基因的表達(dá)，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系和能用文字、圖表以及數(shù)學(xué)方式等多種表達(dá)形式準(zhǔn)確地描述生物學(xué)方面的內(nèi)容的能力。