Question

農業(yè)生產上廣泛使用一種含氮有機化合物的除草劑在土坡中不易降解，長期使用可導致土壤污染．為修復被該除草劑污染的土壤，可按下面程序篩選出能降解該除草劑的細菌．（已知含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明）

（1）從長期使用該除草劑的土坡中取上樣時，一般要先鏟去

 

．
（2）配制的培養(yǎng)基含有

 

類營養(yǎng)物質．培養(yǎng)基在各種成分都溶化后滅菌之前，要進行的操作是

 

（3）圖示過程采用了

 

法將菌種接種在平板上，然后將培養(yǎng)皿

 

放在恒溫菌中培養(yǎng)一段時間，觀察培養(yǎng)基上形成的菌落．
（4）科研人員另取土樣5g，在酒精燈火焰旁加入45mL的

 

中配制成稀釋10倍土壤溶液，然后再配制一定濃度梯度的土壤溶液．將10²倍的稀釋液吸取0.1mL加入到固體培養(yǎng)基上，用

 

將菌液鋪平，將接種的培養(yǎng)皿放置在37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h-48h，每隔一定時觀察并統(tǒng)計具有

 

（現象）
的菌落數．結果如下表，則每克土壤樣品中目的菌株數是

 

．

時間	0	4	8	12	16	24	28	32	36	40	44	48
菌落數	0	0	8	20	24	37	40	40	40	31	15	5

Answer 1

考點：微生物的利用,微生物的分離和培養(yǎng)

專題：

分析：從土壤中分離目的微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株．篩選目的微生物需要使用選擇培養(yǎng)基．培養(yǎng)基的主要營養(yǎng)物質是碳源、氮源、水和無機鹽等，培養(yǎng)基在各種成分都溶化先調節(jié)pH后滅菌．固體培養(yǎng)基上的接種方法主要是稀釋涂布平板法和平板劃線法．

解答： 解：（1）篩選能降解該除草劑的細菌，進行土壤取樣時，一般要先鏟去表層土．
（2）培養(yǎng)基的主要營養(yǎng)物質是碳源、氮源、水和無機鹽等4種，培養(yǎng)基在各種成分都溶化先調節(jié)pH后滅菌．
（3）據圖分析：圖示過程采用的是平板劃線法接種，接種后需要將培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)，以防水汽凝集滴入培養(yǎng)基而污染．
（4）梯度稀釋時，為避免污染，應該使用無菌水稀釋，進行目的微生物的鑒別時可以使用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)，接種使用的工具是涂布器，由于該除草劑的培養(yǎng)基不透明，能降解該除草劑的細菌形成的菌落可以出現透明帶，所以可以鑒別降解該除草劑的細菌．據表分析：應當選擇28、30、32小時時的菌落進行統(tǒng)計計數，所以每克土壤樣品中目的菌株數是4.0×10⁵．
故答案為：
（1）表層土
（2）4     調節(jié)pH
（3）平板劃線    倒置
（4）無菌水     涂布器     透明帶     4.0×10⁵

點評：本題主要考查微生物培養(yǎng)的相關知識，意在強化微生物培養(yǎng)的所以操作過程，提高學生實驗技能．