Question

19．回答下列有關(guān)單克隆抗體的制備和轉(zhuǎn)基因動(dòng)物培養(yǎng)的問題．
（1）某H蛋白質(zhì)是一種抗原蛋白，該蛋白也是一種跨膜蛋白，其結(jié)構(gòu)如圖所示（抗原特性由胞外區(qū)決定）．
①制備免疫小鼠用的H蛋白（抗原）時(shí)，應(yīng)構(gòu)建胞外區(qū)基因，轉(zhuǎn)入原核細(xì)胞表達(dá)并提純．
②B淋巴細(xì)胞成熟于骨髓（填“器官名稱”）中．
③若要制備抗H蛋白單克隆抗體，所培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞是由骨髓瘤細(xì)胞和接受過H蛋白刺激的B淋巴細(xì)胞的融合而成的雜交瘤細(xì)胞．培養(yǎng)過程中應(yīng)保持培養(yǎng)箱中含有5%的CO₂的目的是維持培養(yǎng)液的pH．除了含有各種營(yíng)養(yǎng)成分，滿足適宜的溫度和酸堿性外，通常還要在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防止培養(yǎng)過程中的污染．此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，以便清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成傷害．
（2）胚胎干細(xì)胞（ES）可由囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分離培養(yǎng)獲得，導(dǎo)入外源基因的干細(xì)胞經(jīng)擴(kuò)大培養(yǎng)誘導(dǎo)分化為早期胚胎，隨后即可植入經(jīng)同期發(fā)情處理的代孕雌性動(dòng)物體內(nèi)，獲得轉(zhuǎn)基因動(dòng)物．

Answer 1

分析 1、單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體．
2、胚胎移植的基本程序主要包括：①對(duì)供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體．用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對(duì)供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對(duì)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時(shí)的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段）；④對(duì)胚胎進(jìn)行移植；⑤移植后的檢查．

解答 解：（1）①H蛋白是一種抗原蛋白，也是一種跨膜蛋白，且抗原特性由胞外區(qū)決定，因此制備免疫小鼠用的H蛋白（抗原）時(shí)，應(yīng)構(gòu)建胞外區(qū)基因，轉(zhuǎn)入原核細(xì)胞表達(dá)并提純．
②B淋巴細(xì)胞成熟于骨髓中．
③若要制備抗H蛋白單克隆抗體，所培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞是由骨髓瘤細(xì)胞和接受過H蛋白刺激的B淋巴細(xì)胞的融合而成的．5%的CO₂的目的是維持培養(yǎng)液的pH．在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防止培養(yǎng)過程中的污染．此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，以便清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成傷害．
（2）胚胎干細(xì)胞（ES）來自早期胚胎（囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)）和原始性腺．胚胎移植時(shí)，需要對(duì)供體和受體進(jìn)行同期發(fā)情處理，使供受體具有相同的生理狀態(tài)，保證胚胎移植入相同的生理環(huán)境．
故答案為：
（1）①胞外    ②骨髓     ③H蛋白   pH    抗生素     更換培養(yǎng)液
（2）內(nèi)細(xì)胞團(tuán)     同期發(fā)情

點(diǎn)評(píng) 本題考查單克隆抗體的制備、胚胎移植等知識(shí)，要求考生識(shí)記單克隆抗體的制備過程；識(shí)記胚胎移植的基本程序，掌握胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．