Question

某化工廠的污水池中含有一種有害的難以降解的有機(jī)化合物A．研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，成功篩選到能高效降解化合物A的細(xì)菌（目的菌）．實(shí)驗(yàn)的主要步驟如圖所示．請分析回答下列問題．

（1）培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是

 

，這種培養(yǎng)基屬于

 

培養(yǎng)基．
（2）“目的菌”生長所需的氮源和碳源是來自培養(yǎng)基中的

 

．
實(shí)驗(yàn)需要振蕩，培養(yǎng)，由此推測“目的菌”的代謝類型是

 

．
（3）在上述實(shí)驗(yàn)操作過程中，獲得純凈“目的菌”的關(guān)鍵是

 

．
（4）轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)基時，常采用平板劃線的方法進(jìn)行接種，此過程中所用的接種工具要用

 

滅菌的方法．
（5）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理才能倒掉，這樣做的目的是

 

．
（6）某同學(xué)計(jì)劃統(tǒng)計(jì)污水池中“目的菌”的總數(shù)，他選用10^-4、10^-5、10^-6稀釋液進(jìn)行平板劃線，每種稀釋液都設(shè)置了3個培養(yǎng)皿．從設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的角度看，還應(yīng)設(shè)置的一組空白對照實(shí)驗(yàn)，目的是

 

．
（7）分離得來的目的菌往往帶有一些特殊的基因和蛋白質(zhì)．
①在獲得這些基因的過程中，PCR技術(shù)相當(dāng)重要．PCR擴(kuò)增反應(yīng)中加入引物的作用是

 

．
②利用凝膠過濾法分離該特殊蛋白質(zhì)時（如圖），操作中加樣的正確順序是

 

Answer 1

考點(diǎn)：培養(yǎng)基對微生物的選擇作用,蛋白質(zhì)的提取和分離

專題：

分析：分析題干信息，該實(shí)驗(yàn)的目的是篩選出高效降解化合物A的細(xì)菌，在以化合物A為唯一碳源的培養(yǎng)基中只有能降解化合物A的微生物才能以化合物A為碳源和氮源生長繁殖，不能利用化合物A的微生物因缺乏碳源和氮源，無法生長繁殖；分解化合物A的微生物是需氧微生物，因此在培養(yǎng)過程中應(yīng)該震蕩培養(yǎng)，增加培養(yǎng)液中的溶氧量滿足微生物對氧氣的需求；微生物分離過程中的關(guān)鍵步驟是無菌技術(shù)，防止外來雜菌的污染；對于培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，徹底殺滅包括芽孢在內(nèi)的一切微生物，檢驗(yàn)培養(yǎng)基滅菌是否徹底的方法是對不接著菌種的空白培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，看是否會長出菌落．實(shí)驗(yàn)結(jié)束時應(yīng)該將使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理才能倒掉，防止污染環(huán)境．

解答： 解：（1）培養(yǎng)基中加入化合物A是為分解化合物A的微生物提供碳源和氮源，分離出能分解化合物A的微生物；這中培養(yǎng)基從功能上分屬于選擇培養(yǎng)基．
（2）分析培養(yǎng)基的配方可知，該培養(yǎng)基由化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制而成，因此化合物A為目的菌提供了碳源和氮源；目的菌是需氧微生物，因此在培養(yǎng)過程中應(yīng)該震蕩培養(yǎng)，增加培養(yǎng)液中的溶氧量滿足微生物對氧氣的需求．
（3）獲得純凈“目的菌”的關(guān)鍵是無菌技術(shù)，防止外來雜菌入侵．
（4）平板劃線操作的工具是接種環(huán)，對于接種環(huán)的滅菌方法應(yīng)該是灼燒滅菌．
（5））實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理才能倒掉，防止造成環(huán)境污染．
（6）實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)過程應(yīng)遵循對照原則，該實(shí)驗(yàn)還應(yīng)增設(shè)一組不接種的空白培養(yǎng)基作為對照，以證明培養(yǎng)基制備是否被雜菌污染．
（7）①PCR擴(kuò)增反應(yīng)中加入引物的作用是使DNA聚合酶能夠從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸，提供DNA延伸起始位點(diǎn)．
②利用凝膠過濾法分離該特殊蛋白質(zhì)時，操作的正確順序應(yīng)為圖中的④①②③．
故答案為：
（1）篩選目的菌   選擇   
（2）化合物A  異養(yǎng)需氧型   
（3）防止外來雜菌入侵    
（4）灼燒       
（5）防止造成環(huán)境污染   
（6）證明培養(yǎng)基制備過程中是否被雜菌污染
（7）①結(jié)合在模板DNA上，提供DNA延伸起始位點(diǎn)   ④①②③

點(diǎn)評：本題的知識點(diǎn)是微生物的選擇培養(yǎng)、培養(yǎng)基的成分和制備，常用接種方法和滅菌方法，主要考查運(yùn)用所學(xué)知識解決實(shí)際問題的能力．