Question

2．為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測(cè)定了該河流水樣中的細(xì)菌含量，并進(jìn)行了細(xì)菌的分離等工作．回答下列問(wèn)題：
（1）該小組采用下列圖示方法統(tǒng)計(jì)樣品活菌數(shù)目，該方法叫做稀釋涂布平板法，主要包括梯度稀釋操作和涂布平板操作．在接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格．
（2）將1mL水樣按下圖進(jìn)行操作，從稀釋倍數(shù)為10⁶的試管取樣在3個(gè)平板上分別接入0.1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37．據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為3.8×10¹¹．當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的1個(gè)活菌，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)．
（3）圖中選擇了10⁴、10⁵、10⁶、10⁷倍的稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)，這些平板需要在30～37℃溫度下、pH調(diào)至中性或微堿性培養(yǎng)1-2d
（4）該4小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌．操作時(shí)，接種環(huán)通過(guò)灼燒滅菌，在第二次及以后劃線時(shí)，總是從上一次的末端開(kāi)始劃線．這樣做的目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落．
（5）該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng)，另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)．結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快．分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液的溶解氧的含量，同時(shí)可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率．

Answer 1

分析 本題是對(duì)微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)過(guò)程中對(duì)實(shí)驗(yàn)用品進(jìn)行滅菌常用的方法及檢測(cè)培養(yǎng)基滅菌是否徹底的方法、估算樣品中菌株數(shù)的方法、微生物常用的接種方法和具體操作步驟的綜合性考查，回憶微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)過(guò)程中對(duì)實(shí)驗(yàn)用品進(jìn)行滅菌常用的方法及檢測(cè)培養(yǎng)基滅菌是否徹底的方法、估算樣品中菌株數(shù)的方法、微生物常用的接種方法和具體操作步驟，然后解答問(wèn)題．

解答 解：（1）據(jù)圖分析，圖中使用的是稀釋涂布平板法接種和計(jì)數(shù)的，該方法包括菌液的梯度稀釋和涂布平板接種操作．在接種前，為檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格需要隨機(jī)取若干滅菌后的空平板先行培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察有無(wú)菌落形成．
（2）根據(jù)題意，每升水樣中的活菌數(shù)為（37+38+39）÷0.1×1000×10⁶=3.8×10¹¹個(gè)．平板上的單菌落來(lái)源于樣品稀釋液中的1個(gè)活菌．計(jì)數(shù)時(shí)一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)．
（3）細(xì)菌的最適生長(zhǎng)溫度為30～37℃，pH調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)1-2d．
（4）接種時(shí)，接種環(huán)需要進(jìn)行灼燒滅菌．在第二次及以后的劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線的目的是；將聚集的菌體逐漸稀釋分散以便獲得由單個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的菌落．
（5）由題意可知，振蕩培養(yǎng)比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快，由此可以說(shuō)明該細(xì)菌是需要菌，由于振蕩培養(yǎng)提高培養(yǎng)液中溶解氧的含量，同時(shí)可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率，細(xì)菌生長(zhǎng)速度加快．
故答案為：
（1）稀釋涂布平板  梯度稀釋  涂布平板  檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格　
（2）3.8×10¹¹　1個(gè)活菌   30～300　
（3）30～37℃中性或微堿性  
（4）灼燒   將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落　
（5）溶解氧　營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)

點(diǎn)評(píng) 本題考查微生物培養(yǎng)，意在考查考生識(shí)記所列知識(shí)點(diǎn)，并能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論的能力．