腎小管間質(zhì)炎癥損傷有關的實驗動物模型研究表明．由于腎小管上皮細胞中的骨調(diào)素（OPN）的過度表達，巨噬細胞趨化性浸潤，造成腎小管浸潤炎癥損傷，可利用基因工程方法，采用反義RNA技術對培養(yǎng)的腎小管上皮細胞骨調(diào)素表達量進行調(diào)節(jié)，回答有關問題：
（1）基因工程設計思路是通過向
 
細胞中導入
 
基因的方法，從而
 
細胞中OPN的表達量．
（2）用
 
酶處理含全長cDNA的重組質(zhì)粒后獲得全長cDNA．用
 
酶將cDNA以
 
兩種方式與逆轉錄病毒載體相連．脂質(zhì)體是由
 
雙分子層組成，利用其
 
特點將目的基因?qū)氲脚囵B(yǎng)的細胞．
（3）目的基因表達檢測：
①目的基因整合檢測：
引物A（載體1511-1530）：5’-GTCAAGCCCTTTGTACACCC-3'
引物B（OPN761-740）：5'-ACTGCTCCAGGCTGTGTGTTTC-3'
引物C（OPN332-352）：5'-ATGGACGATGAT-3'
②用引物A和引物B擴增正向插入OPNcDNA片段，用引物
 
和引物
 
擴增反向插入OPNcDNA片段．
考點：基因工程的原理及技術
專題：
分析：反義RNA一般是指與編碼鏈或有義鏈互補的DNA鏈編碼的RNA，mRNA是由編碼鏈或有義鏈編碼的RNA，所以反義RNA和mRNA分子能互補結合呈雙鏈RNA．由于核糖體不能翻譯雙鏈的RNA，所以反義RNA與mRNA特異性的互補結合抑制了翻譯過程．
解答： 解：（1）由于腎小管上皮細胞中的骨調(diào)素的過度表達，巨噬細胞趨化性浸潤，造成腎小管浸潤炎癥損傷，所以基因工程設計思路是通過向腎小管上皮細胞中導入骨調(diào)素mRNA的反義RNA基因的方法，使轉錄形成的反義RNA與mRNA特異性的互補結合抑制翻譯過程，從而抑制細胞中OPN的表達量．
（2）目的基因的獲得需要用限制性核酸內(nèi)切酶切割含全長cDNA的重組質(zhì)粒后獲得全長cDNA，并用DNA連接酶將cDNA以正接和反接兩種方式與逆轉錄病毒載體相連．由于脂質(zhì)體是由磷脂雙分子層組成，具有一定的流動性，從而可以將目的基因?qū)氲脚囵B(yǎng)的細胞．
（3）根據(jù)引物中的堿基序列，用引物A和引物B擴增正向插入OPNcDNA片段，用引物A和引物C擴增反向插入OPNcDNA片段即可．
故答案為：
（1）腎小管上皮   骨調(diào)素mRNA的反義RNA   抑制
（2）限制性核酸內(nèi)切   DNA連接酶   正接和反接   磷脂    流動性
（3）引物A和引物C
點評：本題考查基因工程的相關知識，意在考查學生的識記能力和判斷能力，運用所學知識綜合分析問題的能力．
練習冊系列答案
相關習題

科目：高中生物 來源： 題型：

如圖四條曲線中，你認為最能夠反映不同年齡葉片中Mg2+含量變化的曲線是（　�。�
A、aB、bC、cD、d

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科目：高中生物 來源： 題型：

控制豌豆子葉顏色的等位基因Y和y的本質(zhì)區(qū)別是（　�。�
A、基因Y、y位于同源染色體上
B、Y對y為顯性
C、減數(shù)分裂時基因Y和y分離
D、兩者的堿基序列存在差異

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科目：高中生物 來源： 題型：

用32P標記玉米體細胞（含20條染色體）的DNA，再將這些細胞轉入不含32P的培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時間，發(fā)現(xiàn)某細胞含20條染色體，并有2條被32P標記，則該細胞至少處于（　�。�
A、第一次M期
B、第二次M期
C、第三次M期
D、第四次M期

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科目：高中生物 來源： 題型：

某昆蟲的鞘翅色斑遺傳由4種復等位基因（TA、TB、TC、t）控制，TA、TB、TC對t均為顯性，TA、TB、TC之間為共顯性，這些基因均位于不同的染色體上．該昆蟲種群的表現(xiàn)型種類與基因型種類分別為（　�。�
A、3種；4種
B、6種；7種
C、7種；10種
D、8種；16種

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科目：高中生物 來源： 題型：

現(xiàn)代生物技術
埃博拉病毒（EBO）呈纖維狀，目前分離出五種類型，其中EBOV是一種烈性的、泛嗜性的病毒，它首先破壞吞噬細胞，其次是肝、脾等細胞，進而導致血管通透性增加，出現(xiàn)嚴重的出血熱現(xiàn)象．目前尚無針對該病毒的特效藥或疫苗．

（1）EBOV感染者的血清中很難形成高濃度的抗體，這是因為
 
．
（2）較難制作EBO疫苗的原因與其遺傳物質(zhì)的種類以及表達方式有關．EBO病毒容易變異，這是因為
 
．
（3）EBO基因組為單股負鏈RNA，負鏈RNA的互補鏈才能與核糖體結合．EBO基因組在人體細胞內(nèi)表達蛋白質(zhì)的過程是（以遺傳物質(zhì)、箭頭、過程名等表示）：
 

目前，抗擊EBO的藥物與疫苗的研制主要有兩類技術．
技術類型一：細胞技術
（4）過程①獲得的甲細胞是
 
細胞；過程②是
 
；所用瘤細胞的作用是
 
．
（5）要獲得純凈的單一品種抗體，上述操作的要點是
 
．
技術類型二：基因過程技術--轉基因疫苗
EBO衣殼外有包膜，包膜上有5種蛋白棘突（GP蛋白和VP系列蛋白，見圖2），其中GP蛋白最為關鍵，能被宿主細胞強烈識別．EBO基因組如圖3所示．
（6）該技術的目的基因是
 
．
細菌是疫苗生產(chǎn)重要的角色；腺病毒具有弱致病性，常被用來攜帶目的基因進入宿主細胞的運載體，腺病毒基因組如圖4．其中基因E與復制、轉錄有關；基因L是腺病毒衣殼基因．病毒在人體細胞內(nèi)增殖會導致正常細胞裂解、死亡．因此，需要對腺病毒進行改造．圖5表示轉基因技術生產(chǎn)EBO蛋白疫苗與重組病毒粒子疫苗的基本過程．
（7）以EBO病毒包膜蛋白作為疫苗比較安全，其原因是
 
；缺點是
 
．
（8）生產(chǎn)含目的基因重組病毒粒子作為目的基因的運載體，優(yōu)點是
 
；
為保障安全，基因重組病毒粒子需要除去自身原本的一些基因，改用輔助質(zhì)粒攜帶這些基因．則除去的基因主要是
 
兩類基因．
（9）輔助質(zhì)粒攜帶EBO病毒上的這些基因，與EBO攜帶一樣，均能在真核細胞中表達，說明
 

圖6中neo是新霉素抗性基因，amp表示氨芐青霉素抗性基因，ori是質(zhì)粒的復制子，限制酶BamHⅠ、HindⅢ、PstⅠ、BglⅡ作用位點如下圖7．
（10）要能在大腸桿菌中不斷表達目的基因，同時又能提高重組效率，選擇的限制酶是
 

（11）要篩選出成功導入重組質(zhì)粒的大腸桿菌，并準確定位所需大腸桿菌的菌落，實驗室至少需要兩種培養(yǎng)基，他們分別是
 
兩種培養(yǎng)基．

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科目：高中生物 來源： 題型：

科學研究表明：精神因素（焦慮、緊張等的心理應激）會使T細胞活性下降，對病毒、真菌感染的抵抗能力和對腫瘤細胞的監(jiān)控能力下降，還間接引起機體生成抗體的能力降低．如圖表示神經(jīng)、免疫、內(nèi)分泌三大系統(tǒng)相互調(diào)節(jié)的部分示意圖，請根據(jù)圖回答：
（1）由圖可知，神經(jīng)系統(tǒng)可通過突觸前膜釋放
 
直接調(diào)節(jié)免疫器官或免疫細胞的活動，還可通過有關
 
間接調(diào)節(jié)免疫器官或免疫細胞的活動，以上兩種物質(zhì)作用完成后可能都要
 
活性（填“失去”或“保持”）．
（2）精神因素使T細胞活性下降后，呈遞抗原信息的能力降低，且
 
的分泌量減少，影響了
 
細胞分裂和分化能力，使抗體生成量減少．
（3）若抗體結合到消化道上皮細胞，再接受同一抗原刺激后引起腹瀉嘔吐，這在免疫學上稱為
 
，參與抗體合成與分泌的膜性細胞器有
 
．

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科目：高中生物 來源： 題型：

6月5日是世界環(huán)境日，今年我國的世界環(huán)境日主題是“共建生態(tài)文明、共享綠色未來”．某草原生態(tài)系統(tǒng)的食物網(wǎng)如圖所示．
（1）圖中食物網(wǎng)的簡單，其
 
穩(wěn)定性也相應較低．除圖中所示的生物類群外，該生態(tài)系統(tǒng)的生物組成成分還應有
 
才能保證其物質(zhì)循環(huán)的正常進行．
（2）如果圖中草能提供10000KJ的能量，營養(yǎng)級間的能量傳遞效率為10%～20%，那么鷹占據(jù)的營養(yǎng)級能得到的最低能量值是
 
KJ．若去除蛇，且狐的數(shù)量不變，則草原容納鷹的數(shù)量會
 
．
（3）用標志重捕法調(diào)查該區(qū)的種群數(shù)量時，若部分標記個體遷出，則導致調(diào)查結
果
 
（填“偏高”或“偏低”）

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科目：高中生物 來源： 題型：

下列關于ATP的敘述正確的是（　�。�
①線粒體中大量產(chǎn)生ATP時，一定伴隨著氧氣的消耗；
②葉綠體中大量產(chǎn)生ATP時，一定伴隨著氧氣的產(chǎn)生；
③在生命活動旺盛的細胞中ATP的含量較多；
④ATP與ADP的轉化速率越快，細胞代謝耗能越多；
⑤夜間，葉綠體中C3化合物的還原所需的ATP可以來自線粒體；
⑥白天，葉肉細胞基因表達所需ATP來自葉綠體、線粒體和細胞質(zhì)基質(zhì)．
A、③④⑤⑥B、①④⑤⑥
C、①②④D、①②④⑤⑥

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