分析 分析題圖:目的基因的左側(cè)有限制酶EcoRI的識別序列,右側(cè)是限制酶SmaI的識別序列,而質(zhì)粒上只有限制酶EcoRI的識別序列,所以需要用限制酶EcoRI來切割質(zhì)粒,用限制酶EcoRI和SmaI來切割含有目的基因的外源DNA分子,這樣就使目的基因右側(cè)無法與質(zhì)粒連接,所以目的基因被切割下來和質(zhì)粒連接之前,需在目的基因的右側(cè)連接限制酶EcoRI切割形成的末端,即-TTAA.用限制酶EcoRI切割質(zhì)粒時,會破壞質(zhì)粒上的lacZ'基因,但切割后的質(zhì)粒自身環(huán)化后,lacZ'基因又被修復,能表達產(chǎn)生B-半乳糖苷酶,在X-gal和IPTG 存在下,可以產(chǎn)生藍色沉淀,使菌落呈現(xiàn)藍色,所以菌落①②呈現(xiàn)藍色;菌落③導入的是重組質(zhì)粒,其lacZ'基因被破壞,不能表達產(chǎn)生B-半乳糖苷酶,在X-gal和IPTG 存在下,菌落顏色為白色.
解答 解:(1)由圖可知,目的基因的左側(cè)有限制酶EcoRI的識別序列,右側(cè)是限制酶Sma I的識別序列,而質(zhì)粒上只有限制酶EcoRI的識別序列,所以需要用限制酶EcoRI來切割質(zhì)粒,用限制酶EcoRI和Sma I來切割含有目的基因的外源DNA分子,這樣就使目的基因右側(cè)無法與質(zhì)粒連接,所以目的基因被切割下來和質(zhì)粒連接之前,需在目的基因的右側(cè)連接限制酶EcoRI切割形成的末端,即-TTAA.
(2)將目的基因?qū)氪竽c桿菌細胞之前,應先用Ca2+處理大腸桿菌,使其處于能吸收周圍DNA的感受態(tài)細胞.
(3)用限制酶EcoRI切割質(zhì)粒時,會破壞質(zhì)粒上的lacZ'基因,但切割后的質(zhì)粒自身環(huán)化后,lacZ'基因又被修復,能表達產(chǎn)生B-半乳糖苷酶,在X-gal和IPTG 存在下,可以產(chǎn)生藍色沉淀,使菌落呈現(xiàn)藍色,所以菌落①②呈現(xiàn)藍色;菌落③導入的是重組質(zhì)粒,其lacZ'基因被破壞,不能表達產(chǎn)生B-半乳糖苷酶,在X-gal和IPTG 存在下,菌落顏色為白色.
(4)檢測目的基因是否表達產(chǎn)生蛋白質(zhì),可采用抗原一抗體雜交法.
故答案為:
(1)-TTAA
(2)Ca2+感受態(tài)細胞
(3)菌落③lacZ′標記基因區(qū)插入外源基因后被破壞,不能表達出β?半乳糖苷酶,故菌落為白色
(4)抗原-抗體雜交
點評 本題結(jié)合題圖,考查基因工程的相關(guān)知識,意在考查考生分析題圖提取有效信息的能力;能理解所學知識要點,把握知識間內(nèi)在聯(lián)系的能力;能運用所學知識解決生物學問題的能力.
科目:高中生物 來源: 題型:解答題
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科目:高中生物 來源: 題型:解答題
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科目:高中生物 來源: 題型:解答題
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科目:高中生物 來源: 題型:選擇題
A. | 胰蛋白酶比胰蛋白酶原少了6個肽鍵 | |
B. | 胰蛋白酶原是一條由223個氨基酸組成的多肽 | |
C. | 該激活過程發(fā)生在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體內(nèi) | |
D. | 腸激酶激活胰蛋白酶的過程可避免胰蛋白酶破壞自身的細胞 |
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科目:高中生物 來源:2015-2016學年湖北孝感高級中學高二下期末考試生物卷(解析版) 題型:選擇題
獲取目的基因的方法有多種,下列不屬于目的基因獲取方法的是( )
A.從基因組文庫中獲取 B.從cDNA文庫中獲取
C.利用PCR技術(shù)獲取 D.從含目的基因生物細胞中獲取
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科目:高中生物 來源:2015-2016學年湖北孝感高級中學高二下期末考試生物卷(解析版) 題型:選擇題
在放牧強度較大的草原上采取播撒優(yōu)質(zhì)牧草的種子、施肥、灌溉、控制有害動物等措施,其目的不包括( )
A.設法提高牛、羊的環(huán)境容納量
B.保持草原生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定
C.調(diào)整能量流動方向,使能量流向?qū)θ祟愖钣幸娌糠?/p>
D.實現(xiàn)對能量的分層次多級利用,使廢物資源化
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科目:高中生物 來源: 題型:解答題
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科目:高中生物 來源: 題型:解答題
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