分析 分析題圖:目的基因的左側(cè)有限制酶EcoRI的識(shí)別序列,右側(cè)是限制酶SmaI的識(shí)別序列,而質(zhì)粒上只有限制酶EcoRI的識(shí)別序列,所以需要用限制酶EcoRI來切割質(zhì)粒,用限制酶EcoRI和SmaI來切割含有目的基因的外源DNA分子,這樣就使目的基因右側(cè)無法與質(zhì)粒連接,所以目的基因被切割下來和質(zhì)粒連接之前,需在目的基因的右側(cè)連接限制酶EcoRI切割形成的末端,即-TTAA.用限制酶EcoRI切割質(zhì)粒時(shí),會(huì)破壞質(zhì)粒上的lacZ'基因,但切割后的質(zhì)粒自身環(huán)化后,lacZ'基因又被修復(fù),能表達(dá)產(chǎn)生B-半乳糖苷酶,在X-gal和IPTG 存在下,可以產(chǎn)生藍(lán)色沉淀,使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色,所以菌落①②呈現(xiàn)藍(lán)色;菌落③導(dǎo)入的是重組質(zhì)粒,其lacZ'基因被破壞,不能表達(dá)產(chǎn)生B-半乳糖苷酶,在X-gal和IPTG 存在下,菌落顏色為白色.
解答 解:(1)由圖可知,目的基因的左側(cè)有限制酶EcoRI的識(shí)別序列,右側(cè)是限制酶Sma I的識(shí)別序列,而質(zhì)粒上只有限制酶EcoRI的識(shí)別序列,所以需要用限制酶EcoRI來切割質(zhì)粒,用限制酶EcoRI和Sma I來切割含有目的基因的外源DNA分子,這樣就使目的基因右側(cè)無法與質(zhì)粒連接,所以目的基因被切割下來和質(zhì)粒連接之前,需在目的基因的右側(cè)連接限制酶EcoRI切割形成的末端,即-TTAA.
(2)將目的基因?qū)氪竽c桿菌細(xì)胞之前,應(yīng)先用Ca2+處理大腸桿菌,使其處于能吸收周圍DNA的感受態(tài)細(xì)胞.
(3)用限制酶EcoRI切割質(zhì)粒時(shí),會(huì)破壞質(zhì)粒上的lacZ'基因,但切割后的質(zhì)粒自身環(huán)化后,lacZ'基因又被修復(fù),能表達(dá)產(chǎn)生B-半乳糖苷酶,在X-gal和IPTG 存在下,可以產(chǎn)生藍(lán)色沉淀,使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色,所以菌落①②呈現(xiàn)藍(lán)色;菌落③導(dǎo)入的是重組質(zhì)粒,其lacZ'基因被破壞,不能表達(dá)產(chǎn)生B-半乳糖苷酶,在X-gal和IPTG 存在下,菌落顏色為白色.
(4)檢測目的基因是否表達(dá)產(chǎn)生蛋白質(zhì),可采用抗原一抗體雜交法.
故答案為:
(1)-TTAA
(2)Ca2+感受態(tài)細(xì)胞
(3)菌落③lacZ′標(biāo)記基因區(qū)插入外源基因后被破壞,不能表達(dá)出β?半乳糖苷酶,故菌落為白色
(4)抗原-抗體雜交
點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合題圖,考查基因工程的相關(guān)知識(shí),意在考查考生分析題圖提取有效信息的能力;能理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn),把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系的能力;能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)解決生物學(xué)問題的能力.
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A. | 胰蛋白酶比胰蛋白酶原少了6個(gè)肽鍵 | |
B. | 胰蛋白酶原是一條由223個(gè)氨基酸組成的多肽 | |
C. | 該激活過程發(fā)生在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體內(nèi) | |
D. | 腸激酶激活胰蛋白酶的過程可避免胰蛋白酶破壞自身的細(xì)胞 |
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科目:高中生物 來源:2015-2016學(xué)年湖北孝感高級(jí)中學(xué)高二下期末考試生物卷(解析版) 題型:選擇題
獲取目的基因的方法有多種,下列不屬于目的基因獲取方法的是( )
A.從基因組文庫中獲取 B.從cDNA文庫中獲取
C.利用PCR技術(shù)獲取 D.從含目的基因生物細(xì)胞中獲取
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科目:高中生物 來源:2015-2016學(xué)年湖北孝感高級(jí)中學(xué)高二下期末考試生物卷(解析版) 題型:選擇題
在放牧強(qiáng)度較大的草原上采取播撒優(yōu)質(zhì)牧草的種子、施肥、灌溉、控制有害動(dòng)物等措施,其目的不包括( )
A.設(shè)法提高牛、羊的環(huán)境容納量
B.保持草原生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定
C.調(diào)整能量流動(dòng)方向,使能量流向?qū)θ祟愖钣幸娌糠?/p>
D.實(shí)現(xiàn)對(duì)能量的分層次多級(jí)利用,使廢物資源化
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科目:高中生物 來源: 題型:解答題
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