Question

16．請(qǐng)回答下列生物技術(shù)方面的問(wèn)題．
（1）微生物接種的方法中最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，后者是將菌液進(jìn)行一系列的稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基的表面，再進(jìn)行培養(yǎng)．菌落是在固體培養(yǎng)基上由單個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的形態(tài)可見的子細(xì)胞群體．
（2）菊花的組織培養(yǎng)的大致過(guò)程如圖1所示，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

圖中B、C依次表示脫分化、再分化過(guò)程（填名稱），添加的兩種關(guān)鍵激素是生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素；．該實(shí)驗(yàn)操作成功的關(guān)鍵是無(wú)菌操作（或無(wú)菌技術(shù)），所以要對(duì)外植體、超凈工作臺(tái)等進(jìn)行消毒，對(duì)培養(yǎng)基或培養(yǎng)器具等進(jìn)行殺菌．
（3）同學(xué)乙利用凝膠色譜法進(jìn)行血紅蛋白的分離（如圖2），他在操作中加樣的正確順序是④②①③．

Answer 1

分析 1、微生物接種的方法中最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，前者是指通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種，逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面，后者是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)．
2、植物組織培養(yǎng)是指離體的組織或器官在人工控制的培養(yǎng)基及環(huán)境條件下增殖分化成完整植株的一種無(wú)菌培養(yǎng)技術(shù)；基本過(guò)程：離體的植物組織，器官或細(xì)胞（外植體）脫分化形成愈傷組織，愈傷組織再分化形成胚狀體，進(jìn)一步發(fā)育植株（新植體）．組織培養(yǎng)需用MS培養(yǎng)基，其成分包括大量元素、微量元素及植物激素和有機(jī)物．
3、血紅蛋白的提取與分離的實(shí)驗(yàn)步驟主要有：
（1）樣品處理：①紅細(xì)胞的洗滌（低速短時(shí)間離心），②血紅蛋白的釋放（需要加入蒸餾水和甲苯），③分離血紅蛋白（中速長(zhǎng)時(shí)間離心）．
（2）粗分離：①分離血紅蛋白溶液，②透析．
（3）純化：調(diào)節(jié)緩沖液面→加入蛋白質(zhì)樣品→調(diào)節(jié)緩沖液面→洗脫→收集分裝蛋白質(zhì)．
（4）純度鑒定--SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳．

解答 解：（1）微生物接種的方法中最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，后者是將菌液進(jìn)行一系列的稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基的表面，再進(jìn)行培養(yǎng)，菌落是在固體培養(yǎng)基上由單個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的形態(tài)可見的子細(xì)胞群體．
（2）圖中B、C依次表示脫分化、再分化過(guò)程，添加的關(guān)鍵激素是細(xì)胞分裂素、生長(zhǎng)素．該實(shí)驗(yàn)操作成功的關(guān)鍵是無(wú)菌操作，所以要對(duì)外植體、超凈工作臺(tái)等消毒，對(duì)培養(yǎng)基或培養(yǎng)器具等進(jìn)行滅菌．
（3）④正確的加樣順序可依據(jù)樣品在色譜柱及凝膠層中的滲入量進(jìn)行分析，可以得出是④①②③．
故答案為：
（1）稀釋涂布平板法    稀釋    培養(yǎng)    單個(gè)細(xì)胞
（2）脫分化、再分化   生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素    無(wú)菌操作（或無(wú)菌技術(shù)）     消毒    殺菌
（3）④②①③

點(diǎn)評(píng) 本題考查微生物的分離與培養(yǎng)、植物組織培養(yǎng)、血紅蛋白的分離等相關(guān)知識(shí)，要求學(xué)生理解實(shí)驗(yàn)?zāi)康�、原理、方法和操作步驟，掌握相關(guān)的操作技能，能將這些實(shí)驗(yàn)涉及的方法和技能進(jìn)行綜合運(yùn)用；并對(duì)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和結(jié)果進(jìn)行解釋、分析、處理．