Question

14．轉基因抗病香蕉的培育過程如圖所示．質粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四種限制酶切割位點．請回答：

（1）構建含抗病基因的表達載體A時，應選用PstI、EcoRI限制酶，對質粒和含抗病基因的DNA進行切割．
（2）培養(yǎng)基中的卡那霉素會抑制香蕉愈傷組織細胞的生長，欲利用該培養(yǎng)基篩選已導入抗病基因的香蕉細胞，應使基因表達載體A中含有抗卡那霉素基因，作為標記基因
（3）香蕉組織細胞具有全能性，因此，可以利用植物組織培養(yǎng)技術將導入抗病基因的香蕉組織細胞培育成植株．圖中①、②依次表示組織培養(yǎng)過程中香蕉組織細胞的脫分化和再分化．
（4）若要鑒定抗病基因基因是否插入香蕉愈傷組織細胞，可采用的檢測方法是DNA分子雜交技術；若要鑒定抗病基因是否翻譯成蛋白質，可采用抗原抗體雜交技術檢測．

Answer 1

分析 分析題圖：含抗病基因的DNA含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ的切割位點，其中SmaⅠ酶的切割位點位于抗病基因（目的基因）上；質粒含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ的切割位點．所以要活動重組質粒，可以用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ進行切割．①表示脫分化過程、②表示再分化過程、④是新植體．

解答 解：（1）含抗病基因的DNA含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ的切割位點，但限制酶SmaⅠ的切割位點位于抗病基因上，對SmaⅠ位點進行切割破壞了抗病基因的結構，所以要獲得抗病基因，不能否用限制酶SmaⅠ對圖中對應的位點進行切割．要獲得含抗病基因的重組質粒，應選用PstⅠ、EcoRⅠ限制酶切割質粒．
（2）欲利用含卡那霉素的培養(yǎng)基篩選已導入抗病基因的香蕉細胞，重組質粒中應同時含有抗卡那霉素基因，作為標記基因．
（3）利根據植物細胞具有全能性的原理，利用組織培養(yǎng)技術能將香蕉組織細胞培育成植株．圖中①表示脫分化過程、②表示再分化過程．
（4）鑒定抗病基因基因是否插入香蕉愈傷組織細胞可采用DNA分子雜交技術；鑒定抗病基因是否翻譯成蛋白質可采用抗原抗體雜交技術．
故答案為：
（1）PstI、EcoRI    質粒和含抗病基因的DNA 
（2）抗卡那霉素基因
（3）全能性    植物組織培養(yǎng)  脫分化      再分化
（4）DNA分子雜交技術   抗原抗體雜交技術

點評 本題結合轉基因抗病香蕉的培育過程圖，考查基因工程和植物組織培養(yǎng)技術的相關知識，意在考查考生的識圖能力和理解所學知識要點的能力；能運用所學知識與觀點，對某些生物學問題進行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結論．