Question

人的血清白蛋白在臨床上需求量很大，通常從人血中提�。�由于艾滋病病毒（HIV）等人類感染性病原體造成的威脅與日俱增，使人們對血液制品顧慮重重．如果應用一定的生物工程技術，將人的血清白蛋白基因轉入奶牛細胞中，利用牛的乳腺細胞生產血清白蛋白就成為可能．
大致步驟如下：
a．將人體血清白蛋白基因導入雌性奶牛胚胎細胞，形成重組細胞①； 
b．取出重組細胞①的細胞核，注入去核牛卵細胞中，形成重組細胞②；
c．電脈沖刺激重組細胞②促使其形成早期胚胎；
d．將胚胎移植到母牛的子宮內，最終發(fā)育成轉基因小牛．
請回答下列問題：
（1）步驟a中，獲取的目的基因，在體外可通過

 

大量擴增，在導入雌性奶牛胚胎細胞前，需構建重組DNA，該過程需要的工具酶是

 

．
（2）步驟b利用的技術是

 

，胚胎工程操作中最后環(huán)節(jié)是

 

．
（3）運用細胞培養(yǎng)技術可以從哺乳動物的早期胚胎中獲得胚胎干細胞（ES細胞），培養(yǎng)如下：早期胚胎→內細胞團→胚胎干細胞．在培養(yǎng)過程中，必須用

 

處理內細胞團，使之分散成單個細胞，用于飼養(yǎng)層的細胞一般是

 

，為了防止細胞培養(yǎng)過程中細菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的

 

．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術,胚胎移植,胚胎干細胞的來源及分化

專題：

分析：分析材料：將人體血清白蛋白基因導入雌性奶牛胚胎細胞，形成細胞①，該過程采用了基因工程技術，其原理是基因重組；取出細胞①的細胞核，注入去核牛卵母細胞中，形成細胞②，該過程采用了核移植技術，其原理是動物細胞的細胞核具有全能性；要形成轉基因克隆奶牛還需要采用早期胚胎培養(yǎng)技術和胚胎移植技術．

解答： 解：（1）PCR技術可在體外大量擴增目的基因；構建重組DNA時，需先用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和運載體，之后還需要用DNA連接酶將目的基因和運載體連接形成重組DNA．
（2）由以上分析可知，步驟b利用的是核移植技術；轉基因、核移植或體外受精等任何一項胚胎工程技術所獲得的胚胎，都必須經(jīng)過胚胎移植技術才能獲得后代，因此，胚胎移植是胚胎工程的最后一道“工序”．
（3）在動物細胞培養(yǎng)過程中，必須用胰蛋白酶處理內細胞團，使之分散成單個細胞；用于飼養(yǎng)層的細胞一般是胚胎成纖維細胞；為了防止細胞培養(yǎng)過程中細菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素．
故答案為：
（1）PCR         限制酶（限制性核酸內切酶）、DNA連接酶
（2）核移植      胚胎移植
（3）胰蛋白酶     胚胎成纖維細胞      抗生素

點評：本題考查基因工程、核移植技術、動物細胞培養(yǎng)等知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟；識記核移植技術的概念及過程；識記動物細胞培養(yǎng)的過程及條件，能正確分析材料，同時能結合所學的知識準確答題．