Question

1．我們日常吃的大米中鐵含量極低，科研人員通過基因工程等技術，培育出了鐵含量比普通大米高60%的轉基因水稻，改良了稻米的營養(yǎng)品質．如圖為培育轉基因水稻過程示意圖，請分析回答．

（1）鐵結合蛋白基因來自菜豆，可通過PCR擴增獲取，如果該基因脫氧核苷酸序列已知且比較小，還可化學方法直接人工合成．
（2）鐵結合蛋白基因需插入到 重組Ti質粒上的啟動子和終止子之間．
（3）將含有重組Ti質粒的農(nóng)桿菌與水稻愈傷組織共同培養(yǎng)時，通過培養(yǎng)基2的篩選培養(yǎng)，可以獲得含有重組質粒的愈傷組織；培養(yǎng)基3與培養(yǎng)基2的區(qū)別是生長素和細胞分裂素的濃度比例（植物激素比例）．檢測培育轉基因水稻的目的是否達到，需要檢測轉基因稻米鐵的含量．
（4）將T₀代植株上收獲的種子種植成T₁代株系，檢測各單株的潮霉素抗性．若少數(shù)T₁代株系的所有植株都表現(xiàn)為對潮霉素敏感，但其體內能檢測到鐵結合蛋白基因，造成這一結果最可能的原因是潮霉素基因沒有表達（或潮霉素基因丟失等）．

Answer 1

分析 分析題圖：重組Ti質粒中鐵結合蛋白基因稱為目的基因，潮霉素抗性基因為標記基因；將重組Ti質粒導入受體細胞的方法是農(nóng)桿菌轉化法；將開花后未成熟的胚進行植物組織培養(yǎng)，脫分化形成愈傷組織，作為受體細胞，最終培育形成轉基因水稻，過程中需要生長素和細胞分裂素進行調；據(jù)此答題．

解答 解：（l）獲取目的基因的方法有三種：①從基因文庫中獲�。虎诶�用PCR技術擴增；③人工合成（化學合成）．如果基因的脫氧核苷酸序列已知，可以用化學合成法獲得此目的基因，再用PCR技術進行擴增．
（2）構建重組質粒的過程中，需要將鐵結合蛋白基因需插入到重組Ti質粒上啟動子和終止子的之間，易于重組Ti質粒導入和成功表達．
（3）水稻細胞經(jīng)過脫分化后可形成愈傷組織；質粒上的標記基因為潮霉素抗性基因，因此通過培養(yǎng)基2的篩選培養(yǎng)，可以獲得含有重組質粒的愈傷組織．培養(yǎng)基2中進行的是再分化過程，而培養(yǎng)基3中已經(jīng)形成試管苗，因此培養(yǎng)基3與培養(yǎng)基2的區(qū)別是生長素和細胞分裂素的濃度比例不同．檢測培育轉基因水稻的目的是否達到，需要檢測轉基因水稻成熟種子中鐵含量．
（4）有少數(shù)株系的所有植株都表現(xiàn)為對潮霉素敏感，但其體內能檢測到鐵結合蛋白基因，造成這一結果最可能的原因是潮霉素抗性基因沒有表達或潮霉素抗性基因丟失．
故答案為：
（1）PCR化學
（2）啟動子和終止子
（3）含有重組質粒的愈傷組織生長素和細胞分裂素的濃度比例（植物激素比例）    鐵的含量
（4）潮霉素基因沒有表達（或潮霉素基因丟失等）

點評 本題結合圖解，考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的操作步驟，掌握各步驟中的相關細節(jié)，能正確分析題圖，再結合所學的知識準確答題．