Question

某實驗小組欲從土壤中篩選出能分泌淀粉酶的芽孢桿菌，設(shè)計實驗步驟如下，請給予合理的補充．
（1）采樣與培養(yǎng)：將采集的土樣混勻后稱取1g，置于經(jīng)過

 

法滅菌處理的

 

（填“固體”或“液體”）培養(yǎng)基中，28℃振蕩培養(yǎng)．
（2）接種與選擇：為避免培養(yǎng)液中菌體濃度過高，需將培養(yǎng)液進行

 

處理．之后，將菌液涂布接種于以

 

為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，30℃條件下培養(yǎng)．為避免污染，需將培養(yǎng)皿呈

 

狀態(tài)放置．此外，為排除其他因素的影響，提高實驗可信度，本步驟需設(shè)計

 

作為空白對照．
（3）篩選與純化：將適量的碘液滴加在平板中的菌落周圍，如果菌落周圍的現(xiàn)象是

 

，則說明此種菌能夠

 

．從平板中挑取實驗效果明顯的目的菌株，采用

 

法接種于新的培養(yǎng)基平板，可對菌株進行進一步的純化．

Answer 1

考點：土壤中能分解纖維素的微生物及其應(yīng)用價值

專題：

分析：從土壤中分離目的微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株．培養(yǎng)基一般采用高壓蒸汽滅菌法滅菌，富集培養(yǎng)可以使用液體培養(yǎng)基．選擇培養(yǎng)基是指通過培養(yǎng)混合的微生物，僅得到或篩選出所需要的微生物，其他不需要的種類在這種培養(yǎng)基上是不能生存的．篩選出能分泌淀粉酶的芽孢桿菌必須使用以淀粉為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基．

解答： 解：（1）培養(yǎng)基一般都用高壓蒸汽滅菌法滅菌，因為后面要進行涂布，所以應(yīng)該用液體培養(yǎng)基來培養(yǎng)．
（2）減小培養(yǎng)液菌體濃度一般用梯度稀釋的方法．由于題目要求選出能分泌淀粉酶的芽孢桿菌，所以培養(yǎng)基就應(yīng)只以淀粉為唯一碳源．倒置可以減少培養(yǎng)基受污染，為排除其他因素影響，需要設(shè)置未接種的空白的培養(yǎng)基作對照組．
（3）淀粉被水解，培養(yǎng)基會出現(xiàn)透明圈的現(xiàn)象，明此種菌能夠分泌淀粉酶使淀粉發(fā)生水解．用平板劃線法來培養(yǎng)，可進一步純化菌種．
故答案為：
（1）高壓蒸汽滅菌    液體
（2）系列稀釋（或“梯度稀釋”）   淀粉   倒置      未接種的空白培養(yǎng)基（或“接種等量無菌水的培養(yǎng)基”）
（3）出現(xiàn)透明圈     分泌淀粉酶使淀粉發(fā)生水解     平板劃線

點評：本題主要考查目的微生物的篩選過程，意在強化學(xué)生對微生物的篩選使用的理解，提高實驗技能．