Question

2．運用動物體細胞雜交技術可實現基因定位．研究發(fā)現：用人體細胞與小鼠體細胞進行雜交得到的雜種細胞含有雙方的染色體．雜種細胞在持續(xù)分裂過程中僅保留鼠的染色體而人類染色體則逐漸丟失，只剩一條或幾條．如圖是人的缺乏HGPRT酶突變細胞株（HGPRT^-）和小鼠的缺乏TK酶細胞株（TK^-）融合后并在HAT培養(yǎng)液中培養(yǎng)的過程，結果表明最終人的染色體在融合細胞中僅存有3號染色體或17號染色體或兩者都有．已知只有同時具有HGPRT酶和TK酶的融合細胞才可在HAT培養(yǎng)液中長期存活與繁殖．
（1）體細胞雜交克服了遠緣雜交不親和（或生殖隔離），過程 ①常使用的方法是滅活的病毒．細胞融合完成的標志是融合成一個核．
（2）過程 ②中，為了防止細菌的污染，所用培養(yǎng)液應該添加一定量的抗生素，此外還要定期用胰蛋白酶（膠原蛋白酶）處理細胞，使貼壁生長的細胞脫落形成細胞懸液．
（3）從實驗中所起的作用可以判斷HAT培養(yǎng)基是一種選擇培養(yǎng)基．
（4）從圖示結果看，可以確定人的基因TK 酶位于17號染色體；該方法是否可以對鼠基因定位，為什么？不能，因為雜種細胞中保留了鼠的全部遺傳物質．

Answer 1

分析 根據題意可以看出，該技術可以對人的TK酶基因進行定位．該技術中利用了細胞融合、動物細胞培養(yǎng)等技術，動物細胞培養(yǎng)的條件有：（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌②添加一定量的抗生素③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物；（2）營養(yǎng)物質：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清等天然物質；（3）適宜的溫度和PH；（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO₂．

解答 解：（1）由于不同種生物有性雜交時存在生殖隔離，所以通過體細胞雜交能克服了遠緣雜交不親和的障礙，促進原生質體融合的方法是用滅活的病毒進行誘導．細胞融合完成的標志是兩個細胞的核融合成一個核．
（2）為了防止細菌的污染培養(yǎng)液應該添加一定量的抗生素，還要定期用胰蛋白酶處理細胞，防止接觸抑制，從而使貼壁生長的細胞脫落形成細胞懸液．
（3）根據題意可知，“只有同時具有 HGPRT 酶和 TK 酶的融合細胞才可在 HAT 培養(yǎng)液中長期存活與繁殖”，因此HAT 培養(yǎng)液不僅能提供養(yǎng)料，還起選擇（篩選）作用．
（4）從培養(yǎng)結果可以看出，培養(yǎng)獲得的細胞中均具有鼠的全部染色體，但是只有含人的17號染色體的細胞存活下來，由此可得，人的TK酶基因位于17號染色體．由于鼠的染色體沒有缺失，因此不可以對鼠的基因進行定位．
故答案為：
（1）遠緣雜交不親和（或生殖隔離）     滅活的病毒     融合成一個核 
（2）抗生素      胰蛋白酶（膠原蛋白酶） 
（3）選擇
（4）不能，因為雜種細胞中保留了鼠的全部遺傳物質

點評 本題考查動物細胞融合、動物細胞培養(yǎng)以及基因定位的相關知識，意在考查考生的識記能力、圖文轉換能力和理解能力，難度適中，只要記住相關知識點即可得出正確答案．