Question

某科研單位在調查湖水中細菌的污染情況時進行了實驗．實驗包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察計數(shù)．
（1）培養(yǎng)基中含有蛋白胨、淀粉分別為細菌培養(yǎng)提供了

 

．對培養(yǎng)基進行滅菌，應該采用的方法是

 

．接種時通常采用

 

方法，把聚集的菌種逐步分散到培養(yǎng)基的表面如果提高培養(yǎng)基中NaCl的濃度，可以用于篩選耐鹽細菌，這種培養(yǎng)基被稱為

 

．
（2）該細菌所含的耐鹽基因可通過酶切法獲取，作為基因工程中的目的基因導入小麥中，其過程如圖所示．其中A為

 

，耐鹽基因的小麥細胞還應經過

 

，在此過程中還將使用

 

兩種植物激素，從而最終可獲取含耐鹽基因的小麥植株，當然這些小麥植株并不一定具有耐鹽的特性，這是因為

 

．
（3）圖中C還可用于其他工程細菌中，若成功導入大腸桿菌內，則可能使大腸桿菌獲得哪些特性？

 

．

Answer 1

考點：微生物的分離和培養(yǎng),基因工程的原理及技術

專題：

分析：1、培養(yǎng)基
（1）培養(yǎng)基的營養(yǎng)構成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽．分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基．
（2）常用滅菌方法：灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法．
（3）培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實驗操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌和消毒方法依次：高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌、化學消毒、紫外線滅菌、巴氏消毒法．
（4）選擇培養(yǎng)基的原理是：不同微生物在代謝過程中所需要的營養(yǎng)物質和環(huán)境不同．有的適于酸性環(huán)境，有的適于堿性環(huán)境；例如從土壤中分離放線菌時，可在培養(yǎng)基中加入10%的酚數(shù)滴，抑制細菌和真菌的生長；如培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基中加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，可在培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽．
2、基因工程的步驟
（1）基因工程實施的第一步是獲取目的基因．
（2）第二步需進行基因表達載體的構建工作，是整個過程的核心．需要用限制性核酸內切酶和DNA連接酶，將目的基因和運載體重組． 一個完整的基因表達載體包括：目的基因、啟動子、終止子、標記基因；
（3）第三步是將目的基因導入受體細胞．由于受體細胞是植物細胞，所以最好采用農桿菌轉化法將該目的基因導入并整合到馬鈴薯塊莖細胞的染色體DNA上，從而使目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達．
（4）第四步是目的基因的檢測與鑒定．轉基因生物的DNA是否插入了目的基因可用DNA分子雜交技術；目的基因是否轉錄出了mRNA可用分子雜交技術．

解答： 解：（1）蛋白胨、淀粉分別為細菌培養(yǎng)提供了氮源和碳源，對培養(yǎng)基進行滅菌，應采用高壓蒸汽滅菌，為把聚集的菌種逐步分散到培養(yǎng)基的表面常采用平板劃線法接種，最后利用含高NaCl的濃度的選擇培養(yǎng)基篩選出耐鹽細菌．
（2）圖示中A為運載體，耐鹽基因的小麥細胞還應經過植物組織培養(yǎng)最終可獲取含耐鹽基因的小麥植株，植物組織培養(yǎng)中需用到兩種重要的激素即細胞分裂素和生長素，但不是所有小麥植株都具有耐鹽的特性，因為不是所有的目的基因都導入了受體細胞，并且得到表達．
（3）由于運載體上還有完整的抗氨芐青霉素基因和耐鹽基因，若成功導入大腸桿菌內，則可能使大腸桿菌獲得耐鹽、抗氨芐青霉素的特性．
故答案為：
（1）氮源、碳源        高壓蒸汽滅菌       平板劃線    選擇培養(yǎng)基
（2）（運）載體     植物組織培養(yǎng)     生長素和細胞分裂素   基因選擇性表達
（3）耐鹽、抗氨芐青霉素

點評：本題主要考查微生物的分離及培養(yǎng)、基因工程的過程，意在考查考生對所學知識的理解，把握知識間的內在聯(lián)系的能力．