Question

20．某研究小組進(jìn)行藥物試驗(yàn)時，以動物肝細(xì)胞為材料，測定藥物對體外培養(yǎng)細(xì)胞的毒性．供培養(yǎng)的細(xì)胞有甲、乙兩種，甲細(xì)胞為正常肝細(xì)胞，乙細(xì)胞為肝腫瘤細(xì)胞．請回答下列有關(guān)動物細(xì)胞培養(yǎng)的問題：
（1）將數(shù)量相等的甲細(xì)胞和乙細(xì)胞分別置于培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，培養(yǎng)液及其它培養(yǎng)條件均相同．一段時間后，觀察到甲細(xì)胞數(shù)量比乙細(xì)胞數(shù)量少．
（2）在動物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO₂的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO₂的主要作用是維持細(xì)胞培養(yǎng)液的pH值．
（3）在兩種細(xì)胞培養(yǎng)過程中，當(dāng)甲細(xì)胞鋪滿瓶壁時，會出現(xiàn)接觸抑制（停止分裂增殖）現(xiàn)象，若甲細(xì)胞傳代培養(yǎng)10-50代左右，發(fā)現(xiàn)增殖逐漸緩慢，以至于完全停止，這時部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)（核型）可能會發(fā)生變化．藥物試驗(yàn)需要大量細(xì)胞，兩種細(xì)胞頻繁傳代，甲細(xì)胞比乙細(xì)胞相比，可以傳代的次數(shù)更多的是乙細(xì)胞．若用動物的肝臟組織塊制備肝細(xì)胞懸液，需用胰蛋白酶消化處理．
（4）理論上，乙細(xì)胞可與某種B淋巴細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞，從而來制備單克隆抗體，使患者獲得特異性免疫．

Answer 1

分析 動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程：取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)．
培養(yǎng)條件：（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物．（2）營養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)．（3）溫度和PH．（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO₂（維持培養(yǎng)液的pH值）．

解答 解：（1）肝腫瘤細(xì)胞比正常肝細(xì)胞的分裂能力強(qiáng)，細(xì)胞周期短，因此在其他條件相同時，相同時間內(nèi)肝腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生的子代細(xì)胞多．
（2）細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含有5%CO₂的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，其中CO₂的作用是維持培養(yǎng)液pH．
（3）在兩種細(xì)胞生長過程中，當(dāng)甲細(xì)胞鋪滿瓶壁時，會出現(xiàn)停止現(xiàn)象，若甲細(xì)胞傳代培養(yǎng)10-50代左右，發(fā)現(xiàn)增殖逐漸緩慢，以至于完全停止，這時部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)可能會發(fā)生變化．藥物試驗(yàn)需要大量細(xì)胞，兩種細(xì)胞頻繁傳代，乙細(xì)胞比甲細(xì)胞相比，可以傳代的次數(shù)更多的是乙細(xì)胞．若用動物的肝臟組織塊制備肝細(xì)胞懸液，需用胰蛋白酶消化處理．
（4）理論上，乙細(xì)胞可與某種B淋巴細(xì)胞合成雜交瘤細(xì)胞，從而來制備單克隆抗體，使患者獲得特異性免疫．
故答案為：
（1）少
（2）維持細(xì)胞培養(yǎng)液的pH值
（3）接觸抑制（停止分裂增殖）  遺傳物質(zhì)（核型）   乙   胰蛋白酶
（4）雜交瘤    單克隆抗體

點(diǎn)評 本題考查動物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)知識，要求考生識記動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程及條件，掌握動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的相關(guān)應(yīng)用，能運(yùn)用所學(xué)的知識準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)，屬于考綱識記層次的考查．