Question

15．繼哺乳動物乳腺發(fā)生器研發(fā)成功后，膀胱生物發(fā)生器的研究也取得了一定進展．最近，科學家培養(yǎng)出一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中．請回答：
（1）將人的生長激素基因?qū)胄∈笫荏w細胞，常用方法是顯微注射．
（2）進行基因轉(zhuǎn)移時，通常要將外源基因轉(zhuǎn)入受精卵（早期胚胎）中，原因是受精卵（或早期胚胎）具有全能性，可使外源基因在相應組織細胞中表達．
（3）通常采用DNA分子雜交技術(shù)檢測外源基因是否插入了小鼠的基因組．
（4）在研制膀胱生物反應器時，應使外源基因在小鼠的膀胱上皮細胞中特異表達，所以一般在基因表達載體中插入特異性表達的啟動子，另外該基因表達載體中還應含有生長激素合成基因（目的基因）、終止子、標記基因．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）顯微注射法是將目的基因?qū)雱游锸荏w細胞最有效的方法．
（2）由于受精卵（或早期胚胎細胞）具有全能性，可使外源基因在相應組織細胞表達，因此進行基因轉(zhuǎn)移時，通常要將外源基因轉(zhuǎn)入受精卵（或早期胚胎）中．
（3）檢測外源基因是否插入了小鼠的基因組通常采用DNA分子雜交技術(shù)．
（4）在研制膀胱生物反應器時，應在目的基因前加入膀胱組織特異性表達的啟動子，使外源基因在小鼠的膀胱上皮細胞中特異表達．基因表達載體的組成包括目的基因、標記基因、啟動子和終止子等．
故答案為：
（1）顯微注射
（2）受精卵（早期胚胎）     受精卵（或早期胚胎）具有全能性，可使外源基因在相應組織細胞中表達
（3）DNA分子雜交
（4）膀胱上皮     生長激素合成基因（目的基因）     終止子      標記基因

點評 本題綜合考查基因工程技術(shù)方面的知識，要求考生識記基因工程的原理、操作步驟及應用；識記目的基因檢測與鑒定的方法；明確動物受體細胞運用顯微注射法，并能結(jié)合所學的知識準確答題．