Question

研究表明，PES1基因可能參與細(xì)胞的轉(zhuǎn)化和癌變，從而與腫瘤的發(fā)生發(fā)展有關(guān)．為了進(jìn)一步研究PES1的生物學(xué)功能，研究人員將PES1基因與谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶基因（即GST基因．GST可催化谷胱甘肽與多種環(huán)氧化合物結(jié)合）融合，并制備了PES1的單克隆抗體，其流程圖如圖所示：

（1）圖中的①表示

 

技術(shù)，X細(xì)胞是指

 

細(xì)胞．
（2）研究人員在將pGEX-PES1表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌的同時(shí)，也將pGEX-KG載體導(dǎo)入另一組同種的大腸桿菌．在基因表達(dá)后，用

 

（“GST抗體”或“PES1蛋白抗體”）進(jìn)行抗原-抗體雜交，通過(guò)比較兩組中所檢測(cè)的蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量確定基因融合是否成功．
（3）進(jìn)行GST-PES1融合蛋白的分離和純化時(shí)，可利用GST與

 

之間酶和底物的特異性結(jié)合，從而將GST-PES1融合蛋白與其他蛋白分離．
（4）制備的抗PES1蛋白單克隆抗體具有

 

的特點(diǎn)，可用于檢測(cè)PES1基因在不同的人腫瘤細(xì)胞的表達(dá)．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù),單克隆抗體的制備過(guò)程

專(zhuān)題：

分析：分析題圖：圖示表示制備單克隆抗體PES1的流程，其中①表示采用PCR技術(shù)體外大量擴(kuò)增PES1基因；其次構(gòu)建pGEX-PES1表達(dá)載體；再將基因表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞，并分離和純化GST-PES1融合蛋白；最后制備單克隆抗體PES1．

解答： 解：（1）①表示體外大量擴(kuò)增PES1基因，常采用PCR技術(shù)；X是B淋巴細(xì)胞和小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合形成的雜交瘤細(xì)胞．
（2）無(wú)論基因是否融合，受體細(xì)胞都會(huì)產(chǎn)生PES1蛋白，但只要含有融合基因的受體細(xì)胞才能表達(dá)產(chǎn)生GST蛋白，因此在基因表達(dá)后，用GST抗體進(jìn)行抗原-抗體雜交，通過(guò)比較兩組中所檢測(cè)的蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量確定基因融合是否成功．
（3）根據(jù)題干信息“GST可催化谷胱甘肽與多種環(huán)氧化合物結(jié)合”可知，進(jìn)行GST-PES1融合蛋白的分離和純化時(shí)，可利用GST與谷胱甘肽之間酶和底物的特異性結(jié)合，從而將GST-PES1融合蛋白與其他蛋白分離．
（4）單克隆抗體的特點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高．
故答案為：
（1）PCR   　雜交瘤
（2）GST抗體
（3）谷胱甘肽
（4）特異性強(qiáng)、靈敏度高

點(diǎn)評(píng)：本題結(jié)合圖解，考查基因工程和單克隆抗體的制備等知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟；識(shí)記單克隆抗體的制備過(guò)程及單克隆抗體的特點(diǎn)，能結(jié)合圖中和題中信息準(zhǔn)確答題．