Question

19．將刺槐的耐鹽堿基因轉(zhuǎn)移到主要的農(nóng)作物水稻體內(nèi)，可以增大水稻的種植面積，科學(xué)利用鹽堿地．
（1）刺槐基因組文庫含有該生物種群的全部基因；用刺槐發(fā)育的某個時期的mRNA逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的多種互補(bǔ)DNA（ cDNA）片段，與載體連接后儲存于一個受體菌群，建立cDNA文庫．與基因組文庫相比cDNA文庫的基因中無啟動子和內(nèi)含子．
（2）培育耐鹽堿的轉(zhuǎn)基因水稻可以從刺槐的基因組文庫中篩選出耐鹽堿基因插入到（Ti質(zhì)粒的）T-DNA上，通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，使耐鹽堿基因進(jìn)入水稻細(xì)胞并將其插入水稻細(xì)胞中的染色體上．
（3）將轉(zhuǎn)基因水稻細(xì)胞通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)得到轉(zhuǎn)基因植株，要確認(rèn)該耐鹽堿基因是否在水稻植株中正確表達(dá)，應(yīng)檢測此水稻植株中該基因的表達(dá)產(chǎn)物，如果檢測結(jié)果呈陽性，再在田間試驗中檢測植株的耐鹽堿性是否得到提高．
（4）讓二倍體轉(zhuǎn)基因耐鹽堿水稻自交，子代中耐鹽堿與不耐鹽堿植株的數(shù)量比為3：1，推測該耐鹽堿基因整合到了同源染色體的一條上（同源染色體的一條上、同源染色體的兩條上）．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）基因組文庫包含某種生物所有的基因；部分基因文庫包含某種生物的部分基因；用刺槐發(fā)育的某個時期的mRNA逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的多種互補(bǔ)DNA片段，與載體連接后儲存于一個受體菌群，建立cDNA文庫．與基因組文庫相比cDNA文庫的基因中無啟動子和內(nèi)含子．
（2）培育耐鹽堿的轉(zhuǎn)基因水稻可以從刺槐的基因組文庫中篩選出耐鹽堿基因插入到T-DNA上，通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，使耐鹽堿基因進(jìn)入水稻細(xì)胞并將其插入水稻細(xì)胞中的染色體上．
（3）由轉(zhuǎn)基因水稻細(xì)胞得到轉(zhuǎn)基因植株可通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)，要檢測目的基因是否表達(dá)，應(yīng)檢測此水稻植株中該基因的表達(dá)產(chǎn)物耐鹽堿性，如果檢測結(jié)果呈陽性，再在田間試驗中檢測植株的耐鹽堿性是否得到提高．
（4）讓二倍體轉(zhuǎn)基因耐鹽堿水稻自交，若子代中耐鹽堿與不耐鹽堿植株的數(shù)量比為3：1，為自交比例，說明耐鹽堿基因整合到了同源染色體的一條上，若整合到了同源染色體的兩條上，則后代均為耐鹽堿型．
故答案為：
（1）全部    逆轉(zhuǎn)錄    啟動子    內(nèi)含子
（2）篩選  （Ti質(zhì)粒的）T-DNA     
（3）植物組織培養(yǎng)    表達(dá)產(chǎn)物    耐鹽堿性
（4）同源染色體的一條上

點評 本題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)問題，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確判斷各選項．