Question

17．河北農(nóng)科院的科學(xué)家通過基因工程培育抗蟲棉時(shí)，需要從蘇云金芽孢桿菌中提取出抗蟲基因，“放入”棉花的細(xì)胞中與棉花的DNA結(jié)合起來并發(fā)揮作用，請(qǐng)回答下列有關(guān)問題：
（1）從蘇云金芽孢桿菌中切割抗蟲基因所用的工具是限制性核酸內(nèi)切酶，此工具主要存在于微生物中，其特點(diǎn)是能識(shí)別特定的脫氧核苷酸序列并在特定位點(diǎn)切斷DNA．
（2）蘇云金芽孢桿菌一個(gè)DNA分子上有許多基因，獲得抗蟲基因常采用的方法是“鳥槍法”．具體做法是：用限制性核酸內(nèi)切酶將蘇云金芽孢桿菌的DNA切成許多片段，然后將這些片段分別與運(yùn)載體結(jié)合，再通過運(yùn)載體轉(zhuǎn)入不同的受體細(xì)胞，讓它們?cè)诟鱾�(gè)受體細(xì)胞中大量復(fù)制，從中找出含有目的基因的細(xì)胞，再用一定的方法把帶有目的基因的DNA片段分離出來．
（3）進(jìn)行基因工程操作一般要經(jīng)過的四個(gè)步驟依次是提取目的基因、目的基因與運(yùn)載體結(jié)合、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)和表達(dá)．

Answer 1

分析 1、關(guān)于限制酶，考生可以從以下幾方面把握：
（1）來源：主要從原核生物中分離純化出來．
（2）特異性：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂．
（3）結(jié)果：形成黏性末端或平末端．
2、基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）獲取目的基因的工具是限制酶，其主要存在于微生物中，特點(diǎn)是能識(shí)別特定的脫氧核苷酸序列并在特定位點(diǎn)切斷DNA．
（2）蘇云金芽孢桿菌一個(gè)DNA分子上有許多基因，獲得抗蟲基因常采用的方法是“鳥槍法”．具體做法是：用限制性核酸內(nèi)切酶將蘇云金芽孢桿菌的DNA切成許多片段，然后將這些片段分別與運(yùn)載體結(jié)合，再通過運(yùn)載體轉(zhuǎn)入不同的受體細(xì)胞，讓它們?cè)诟鱾�(gè)受體細(xì)胞中大量復(fù)制，從中找出含有目的基因的細(xì)胞，再用一定的方法把帶有目的基因的DNA片段分離出來．
（3）進(jìn)行基因工程操作一般要經(jīng)過的四個(gè)步驟依次是：提取目的基因、目的基因與運(yùn)載體結(jié)合、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)和表達(dá)．
故答案為：
（1）限制性核酸內(nèi)切酶   微生物    能識(shí)別特定的脫氧核苷酸序列并在特定位點(diǎn)切斷DNA
（2）鳥槍法    分別與運(yùn)載體結(jié)合    帶有目的基因的DNA片段
（3）提取目的基因    目的基因與運(yùn)載體結(jié)合  將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞    目的基因的檢測(cè)和表達(dá)

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)問題；識(shí)記基因工程的操作工具及其特點(diǎn)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．