Question

14．如圖1是利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)生產(chǎn)干擾素的簡(jiǎn)化流程．請(qǐng)分析回答：
（1）過(guò)程①使用的限制酶酶能使特定部位的兩個(gè)脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵（化學(xué)鍵）斷開(kāi)．運(yùn)載體的黏性末端與目的基因DNA片段的黏性末端就可通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則而結(jié)合． 過(guò)程②需要用到DNA連接酶．
（2）圖中A的名稱是重組質(zhì)粒，A上應(yīng)有RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，以驅(qū)動(dòng)干擾素基因轉(zhuǎn)錄，該部位稱為啟動(dòng)子．
（3）為直接檢測(cè)干擾素基因是否轉(zhuǎn)錄，可從細(xì)胞中提取RNA與用放射性同位素標(biāo)記的目的基因作的探針進(jìn)行分子雜交．
（4）利用PCR擴(kuò)增儀大量擴(kuò)增目的基因的前提是目的基因的核苷酸序列要有一段是已知的，以便根據(jù)這一序列合成引物，除了該物質(zhì)和目的基因外，擴(kuò)增儀中還需加入四種脫氧核苷酸和耐高溫的DNA聚合（Taq酶）酶，并適時(shí)調(diào)整溫度，才能使目的基因數(shù)量成指數(shù)式增長(zhǎng)．
（5）在該工程中所用的基因“剪刀”能識(shí)別的序列和切點(diǎn)是-GGATCC-．請(qǐng)?jiān)趫D2中畫(huà)出質(zhì)粒被切割形成黏性末端的過(guò)程圖．

Answer 1

分析 分析圖1：圖中①過(guò)程表示利用同一種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，以獲得相同的黏性末端；②過(guò)程表示利用DNA連接酶構(gòu)建基因表達(dá)載體；③過(guò)程表示將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞．

解答 解：（1）切割目的基因和質(zhì)粒需用同一種限制性核酸內(nèi)切酶．限制酶破壞脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵；②是基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程，該過(guò)程還需要DNA連接酶將目的基因與質(zhì)粒連接形成重組質(zhì)粒．
（2）圖中A為重組質(zhì)粒；驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄的結(jié)構(gòu)是啟動(dòng)子．
（3）檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄，可采用分子雜交技術(shù)，即從細(xì)胞中提取RNA與用放射性同位素標(biāo)記的目的基因作探針進(jìn)行分子雜交．
（4）利用PCR擴(kuò)增儀大量擴(kuò)增目的基因的前提是目的基因的核苷酸序列要有一段是已知的，以便根據(jù)這一序列合成引物，除了該物質(zhì)和目的基因外，擴(kuò)增儀中還需加入四種脫氧核苷酸和熱穩(wěn)定DNA聚合酶，并適時(shí)調(diào)整溫度，才能使目的基因數(shù)量成指數(shù)式增長(zhǎng)．
（5）黏性末端是兩條鏈，如圖：
-G′GATCC--G     GATCC-
-C CTAGG--CCTAG     G-
故答案為：
（1）限制酶   磷酸二酯鍵    DNA連接  
（2）重組質(zhì)粒   啟動(dòng)子
（3）RNA    分子雜交 
（4）引物   耐高溫的DNA聚合（Taq酶）
（5）-G′GATCC--G      GATCC-
-C CTAGG--CCTAG      G-

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合利用利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)生產(chǎn)干擾素的簡(jiǎn)化流程，考查基因工程的技術(shù)及原理及應(yīng)用，要求考生識(shí)記基因工程的原理及技術(shù)，能準(zhǔn)確判斷圖中各過(guò)程的名稱，能運(yùn)用所學(xué)的知識(shí)結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確判斷各題．