Question

綠色熒光蛋白基因（GFP）被發(fā)現(xiàn)以來，一直作為一個(gè)監(jiān)測(cè)完整細(xì)胞和組織內(nèi)基因表達(dá)及蛋白質(zhì)位置的理想標(biāo)記．請(qǐng)根據(jù)圖回答下列問題．
（1）已知GFP是從水母的體細(xì)胞中提取出的一種基因，提取它時(shí)通常利用的酶是

 

．
（2）若GFP的一端伸出的核苷酸的堿基序列是-TCGA-，另一端伸出的核苷酸的堿基序列是-TGCA-，則在構(gòu)建含該GFP的重組質(zhì)粒時(shí)，應(yīng)選用的限制酶是

 

（請(qǐng)?jiān)趫D中選擇）．
（3）若將含GFP的重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞，則常用的方法是

 

．檢測(cè)GFP是否已重組到豬胎兒成纖維細(xì)胞的染色體DNA上，可采用

 

技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)．
（4）欲進(jìn)一步將已導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的豬胎兒成纖維細(xì)胞培養(yǎng)成帶有綠色熒光蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)基因豬，還需利用

 

技術(shù)，將導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的豬胎兒成纖維細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的豬的卵母細(xì)胞中，從而形成重組細(xì)胞，再進(jìn)一步培養(yǎng)成旱期胚胎，通過

 

技術(shù)轉(zhuǎn)移到豬的子宮中，從而得到綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬．
（5）為了加快繁殖速度，可對(duì)（4）中的早期胚胎進(jìn)行

 

．也可將得到的綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬（雌性），用

 

處理，使之超數(shù)排卵，提高其繁育能力．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：限制酶：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂．
目的基因?qū)�入植物�?xì)胞常用的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞的方法是顯微注射法；目的基因?qū)�入微生物需要用Ca²⁺處理，使其成為感受態(tài)細(xì)胞．

解答： 解：（1）切割目的基因時(shí)利用了酶的專一性，通常利用的酶是限制酶．
（2）根據(jù)題中信息及所學(xué)的相關(guān)內(nèi)容，能與-TCGA-互補(bǔ)配對(duì)的是-AGCT，能與-TCGA-互補(bǔ)配對(duì)的是-ACGT-，則在構(gòu)建含GFP的重組質(zhì)粒A時(shí)，應(yīng)選用的限制酶是HindⅢ和PartⅠ．
（3）將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞常用的方法為顯微注射法．檢測(cè)目的基因是否進(jìn)入受體細(xì)胞的方法為DNA分子雜交．
（4）目前還不能用類似植物組織培養(yǎng)的方法獲得完整的動(dòng)物個(gè)體，用動(dòng)物體細(xì)胞克隆的動(dòng)物，實(shí)際上是通過核移植來實(shí)現(xiàn)的．通過胚胎移植可將早期胚胎移入豬的子宮中．
（5）采用胚胎分割移植技術(shù)，可獲得多個(gè)后代．也可以將已培育的轉(zhuǎn)基因克隆母豬利用促性腺激素處理，使之超數(shù)排卵，從而提高其繁育能力．
故答案為：
（1）限制酶
（2）HindⅢ和PartⅠ
（3）顯微注射技術(shù)     DNA分子雜交
（4）核移植    胚胎移植
（5）胚胎分割    促性腺激素

點(diǎn)評(píng)：本題考查基因工程和胚胎工程，意在考查考生識(shí)記所列知識(shí)點(diǎn)的能力，并能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)解決相關(guān)問題．